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15596026
15596026赛默飞TRIzol试剂Thermo逆转录酶 PCR cDNA文库构建
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文献和实验RNA 构建cDNA文库要求的RNA量比做RACE和Northern blot的要多,在材料允许的情况下一般的试剂盒均推荐采用纯化总mRNA后进行反转录,这比直接采用总RNA进行反转录而构建的cDNA文库好,虽然后者也并不是不能做。老版本CLONTECH的SMART 4的中级柱子要求纯化后的总mRNA量最好在0.05-0.5微克左右,这就要求起始总RNA量较多。虽然有的试剂盒声称少至几十个纳克的总RNA也可以构建cDNA文库,但这是针对材料极为稀缺者而言,但起始RNA太少还是会或多或少影响文库构建
on the cDNA cloning protocol in the sense that often 'anchored PCR' on the DNA/RNA-hybrid is carried out using conserved regions in order to amplify a certain type of cDNA species which can subsequently directly be inserted in the cloning vector.
PCR352 请教: 本人想利用特异性抗体结合CDNA法筛选某蛋白的膜受体,这种方法是否可行?cDNA文库构建工作量大不大?如果构建膜蛋白的cDNA文库,是否就是提取膜蛋白的RNA,然后反转录成CDNA,然后转化就可以了? 本人不是生化专业,理论知识欠缺,还请高手指教。 zhujoker 为什么用抗体呢? biogenesci 膜蛋白酵母双杂交有专门的试剂盒的,可以找公司问问
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