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11360070
除了葡萄糖以外,丙 酮酸钠通常还作为碳来源添加到细胞培养基中。由于细胞在糖酵解途径中将丙 酮酸钠作为中间代谢物,因此它不是所有细胞培养所需要的添加剂。然而,如果细胞在补充了丙 酮酸钠的培养基中生长,我们建议继续使用添加剂,因为无该添加剂时细胞生长可能会缓慢。Gibco™ 丙 酮酸钠 (100 mM) 使用每升水 11 g 配制。大多数细胞培养基中使用的丙 酮酸钠的最终浓度为 1 mM
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文献和实验力,即使目标蛋白的浓度低,使用 Strep-Tactin®XT 仍可以有效的捕捉上清中的目标蛋白。表 C 整理了几个实验的数据,显示当目标蛋白浓度低于 20 μl/ml 时,得率仍能达到几近 100%。表 C3 Strep-Tactin®XT 普适性高除了上述实验所用的 CHO 细胞株外(中国仓鼠卵巢细胞),另一常用于生产蛋白的哺乳动物细胞株为 HEK293(人胚胎肾细胞),使用上较 CHO 简单。我们测试了 Strep-Tactin®XT 的纯化表现 : 表 D1 为以 Expi293 表达 SEAP
在哺乳动物细胞中进行RNA干扰:设计,实验和分析siRNA效应
在哺乳动物细胞中进行RNA干扰:设计,实验和分析siRNA效应 转录后基因沉默,也称为RNA干扰,是指双链RNA分子阻断或者降低同源基因的表达的现象。这种现象可能是作为一种抑制病毒感染和转座子跳跃的细胞防御机制(Ketting et. al., 1999; Tabara et. al., 1999; Jensenet. al., 1999; Ratcliff et. al., 1999)。在体内,双链RNA被内源的核糖核酸酶降解为21-23个碱基大小的小分子干扰RNA(small
机于4℃以12 000g离心5分钟即可。如需去除氧钒核糖核苷复合物,用含0.1%羟喹啉的苯酚[用0.01mol/L Tris.Cl(pH7.8)平衡]将RNA终溶液抽提数次即可。 4. 对大多数细胞株来说, 一个直径90mm 培养甲中培养的RNA收率为100-200μg。
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