Recombinant Human HMGB2 protein

Recombinant Human HMGB2 protei

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  • ¥1290 - 3960
  • 帛科
  • BK-DB6867
  • 国产
  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      Recombinant Human HMGB2 protein

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      上海帛科

    • 保存条件

      -20 to -80 °C

    • 规格

      50μg、100ug 、1mg

    商品介绍:
    货号 BK-DB6867 用途 仅供科研研究实验
    纯度 >90% as determined by SDS-PAGE 预测分子量 23.04 kDa
    表达宿主 E.coli 种属 Homo sapiens (Human)
    内毒素: Please contact with the lab for this information.
    蛋白构建: A DNA sequence encoding the human HMGB2 (Gly2-Pro187) was fused with His tag
    制剂: Supplied as solution form  in  PBS pH 7.5 or lyophilized  from PBS pH 7.5.
    运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
    稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
    复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
    分子别名: High mobility group protein B2,High mobility group protein 2,HMG-2.
    背景介绍: Multifunctional protein with various roles in different cellular compartments. May act in a redox sensitive manner. In the nucleus is an abundant chromatin-associated non-histone protein involved in transcription, chromatin remodeling and V(D)J recombination and probably other processes. Binds DNA with a preference to non-canonical DNA structures such as single-stranded DNA. Can bent DNA and enhance DNA flexibility by looping thus providing a mechanism to promote activities on various gene promoters by enhancing transcription factor binding and/or bringing distant regulatory sequences into close proximity. Involved in V(D)J recombination by acting as a cofactor of the RAG complex: acts by stimulating cleavage and RAG protein binding at the 23 bp spacer of conserved recombination signal sequences (RSS). Proposed to be involved in the innate immune response to nucleic acids by acting as a promiscuous immunogenic DNA/RNA sensor which cooperates with susequent discriminative sensing by specific pattern recognition receptors. In the extracellular compartment acts as a chemokine. Promotes proliferation and migration of endothelial cells implicating AGER/RAGE. Has antimicrobial activity in gastrointestinal epithelial tissues . Involved in inflammatory response to antigenic stimulus coupled with proinflammatory activity  Involved in modulation of neurogenesis probably by regulation of neural stem proliferation . Involved in articular cartilage surface maintenance implicating LEF1 and the Wnt/beta-catenin pathway .
    重组蛋白质的可溶性鉴定:
    1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中,然后在-80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
    2. 冰中解冻。
    3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次, 每次 10 sec,间歇 10 sec,电压 200-300 V。
    4. 10000g,4oC,离心 20min,取上清(为溶液 A), - 20 oC 保存; 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解(为溶液 B),同样 -20 oC 保存,供后继分析使用。
    5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳, 考马斯亮蓝染色, 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中, 则为可溶性蛋白;如果是在 B 溶液中,则为非可溶蛋白。

    Recombinant Human HMGB2 protei
    重组蛋白质的分离纯化:
    1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2(Lysis buffer under denaturing conditions )中,室温下搅拌和吹打沉淀,避免泡沫生成。
    2. 10000g ,4 oC,离心 30 min,收集上清液。
    3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子,并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统,用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose,调节 A280 值至零线。
    4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中, 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
    5. 分别用 5 ~ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2(Washbuffer 1 and 2)清洗柱 子,直至 A280 值低于 0.01。
    6. 用洗脱液(Elution buffer)洗脱重组蛋白质, 在 A280 值监测下,收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。

    Recombinant Human HMGB2 protei
    表达载体在基因工程有以下几种元件:
    (1)选择标志的编码序列;
    (2)可控转录的启动子;
    (3)转录调控序列(转录终止子,核糖体结合位点);
    (4)一个多限制酶切位点接头;
    (5)宿主体内自主复制的序列。

    Recombinant Human HMGB2 protei
    重组蛋白质的诱导表达:
    1. 挑取转化有质粒的单菌落, 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中, 37 oC,250 rpm/min 振摇培养过夜。
    2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml(1:20)选择性 LB 液体培养基 中, 37 oC,250 rpm/min 振摇培养至光密度(OD600=0.6)时,取 1 ml 样本作 为诱导前标本, 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀,-20 oC 冻存备用。
    3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中,使 IPTG 终浓度为 1 mM ,37 oC ,250 rpm/min 振摇培养 4 ~ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本,同上法收集菌体沉淀, -20 oC 冻存备用。
    4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS(pH= 8.0)重悬, 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液, 煮沸加热 5min,SDS 聚凝胶(SDS-PAGE)电泳分离 , 考马斯亮蓝染色 3 小时后,脱色观察结果。
    5. 选取诱导成功的细菌克隆,扩大诱导规模,收集菌体沉淀,于- 20 oC 保存,准备做下一步分析及纯化。
    公司出售的相关产品:
    锌指蛋白804B封闭多肽  
    CD84封闭多肽 KMT1C/G9a Antibody Blocking Peptide
    染色体结构维持蛋白4封闭多肽 phospho-CDKN2A/p16-INK4a (Ser8) Antibody Blocking Peptide
    FBG4蛋白封闭多肽 SFXN3 Antibody Blocking Peptide
    腺苷受体蛋白封闭多肽 phospho-14-3-3 (Ser58) Antibody Blocking Peptide
    肾细胞癌抗原nyren39封闭多肽 CENPT Antibody Blocking Peptide
    嗅觉受体51B2封闭多肽 NDUFA4 Antibody Blocking Peptide
    锌指蛋白ZBTB6封闭多肽 PLXNB1 Antibody Blocking Peptide
    莱克多巴胺牛血清白蛋白偶联物 OR5T3 Antibody Blocking Peptide
    LFN13蛋白封闭多肽 CD207 Antibody Blocking Peptide
    磷酸化波形蛋白封闭多肽 Recombinant human Serum Albumin, His & Avi (HEK293)
    220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白封闭多肽 TCAIM Antibody Blocking Peptide
    泛素蛋白连接酶D2封闭多肽 Recombinant Human HMGB2 proteinCACNB1 Antibody Blocking Peptide
      SH2D7 Antibody Blocking Peptide
    磷酸化整合素β2/ntegrn β2封闭多肽 Recombinant human IL-4R-Alpha protein, C-His (HEK293)

     

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