Sartorius赛多利斯SDLV-0250-10E0-2S

考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量定

试剂 考马斯亮蓝G-250 的配制：称取100mg 考马斯亮蓝G-250，溶于50mL90％乙醇中，加入85％（W／V）的磷酸100mL，最后用蒸馏水定容到1 000mL。此溶液在常温下可放置一个月。 （3）乙醇 （4）磷酸（85％）四、操作步骤 1．标准曲线制作 （1）0~100μg／mL 标准曲线的制作：取6 支10mL 干净的具塞试管，按表1 取样。盖塞后，将各试管中溶液纵向倒转混合，放置2min 后用1cm

考马斯亮蓝G—250染色方法

一、原理：考马斯亮蓝G—250法于1976年由Bradform建立。考马斯亮蓝G—250具有红色和蓝色两种色调，在酸性溶液中，其以游离态存在呈棕红色，当它与蛋白质通过疏水作用结合后，变为蓝色。色素对可见光谱的最大吸收值从465nm转移到595nm处。蛋白质和色素的结合反应很快速，约在2分钟左右的时间内达到平衡，在室温1小时之内是稳定的。在0．01一1.0mg蛋白质／m1范围内，蛋白质含量与A 595值呈正比。二、染液配制： 100mg的考马斯克蓝G—250溶解于50m1 95％的乙醇中，加入

v468 chapter 5 糖原合成酶激酶-3 的抑制

, 10 μg/mL leupeptin, 1 mM phenylmethanesulfonylfluoride (PMSF), and 1 mM sodium orthovanadate. 6. Teflon cell scrapers (Fisher, Pittsburgh, PA ). 7. 2× SDS sample buffer for electrophoresis: 0.0375 M Tris-HCl, pH 6.5, 8% (w/v) SDS, 10% (v/v