赛默飞世尔Thermo Fisher CRUCIBLE 50

Stripping Western Blots

accordingly with growth factor. 3) Wash cells x 2 with ice-cold PBS and then lyse in modified RIPA buffer (50 mM Hepes, pH 7.5, 1% NP-40, 0.5% sodium deoxycholate, 150 mM NaCl, 50 mM NaF, 1 mM sodium vanadate, 1 mM nitrophenylphosphate, 5 mM benzamidine, 0.2

AAV最新进展

5共感染。pGEM3Z质粒(Promega)被共转染后保持不同转染的相同总DNA浓度。对于伴随Ad感染的转染，在加入DNA到细胞前病毒被吸附到无血清培养基中细胞单层上1h。转染后72小时，细胞被刮到2ml培养基中收获起来。细胞随后用1ml无菌PBS清洗。PBS清洗液加到细胞悬浮物中，冻融5次后超声破碎(3,36mm 45s)。提取物在4000´g离心10分钟去除细胞碎片，裂解液上清含有重组载体vAVgfp，它将被用到随后的转导中。在转导之前，这些转染的Ad用 56°C热处理30分钟。 对于大规模载体