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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
43
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
—20℃
- 规格:
100ml
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商品属性:
| 产品名称 | Western及IP细胞裂解液 | 产品编号 | A-RY5148 |
| 规格 | 100ml | 用途 | 仅用于科研 |
温和裂解细胞提取总蛋白质,主要用于Western,免疫沉淀,免疫共沉淀等。对于普通的Western、IP或co-IP,我们推荐使用本裂解液,非变性组织细胞裂解液主要由Tris 、NaCl、Triton X-100组成。含有一支1.5ml PMSF。用本裂解液得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。 —20℃,12个月
标准品的贮存:
不同的标准品应根据其理化性质、贮存要求的不同选择适宜的贮存环境和条件,分别置于规定的位置。
常温保存:通常用于化学性质比较稳定的标准品,建议保存于干燥阴凉的地方。
+4度冷藏:用于常温下不是很稳定的物质,保存于冰箱冷藏室。
-20度冷冻:用于化学性质不稳定,常温下容易分解的物质。
-80度冷冻:一些具有活性的物质,需要保存于特定的-80度的冰箱。
贮存环境:
贮存室应尽量设置空调设施,保证室内阴凉、干燥、避光、通风,温度在25+-5℃,相对湿度在50~70%为宜。特殊品种要求严格按照规定的贮存条件妥善保存。
标准品应放在干燥器或其它适宜容器中保存,每一个干燥器或容器外应有区别于标准品编号的特殊编码,以示存放位置。干燥器置于专用的柜中,依次排列整齐,并由专人管理。
标准品贮存应由管理员每天上下午各检查1次温度、湿度并做记录。凡不符合规定要求的,应及时调整纠正。多雨季节时,保管员要增加检查频次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
公司正在出售的产品:
| 异麦芽四糖isomaltotetraose | 11,15-二羟基-16-贝壳杉烯-19-酸5-(Z-Heptadec-8-enyl)resorcinol |
| 11Beta-羟基洋椿苦素Norkhellol | 胆固醇24α7羟化酶封闭多肽 |
| 11-O-没食子酰岩白菜素Methyl lucidenate A | 半乳糖凝集素3单克隆抗体 |
| 12-羟基松香酸Betulinic acid palmitate | CD2结合蛋白3抗体 |
| 12-乙酰氧基松香酸16,25-Di-O-acetylcucurbitacin F | 二氢嘧啶酶相关蛋白2(CRMP2/DPYL2)抗体 |
| 13(18)-齐墩果烯-3-醇Hemslecin D | 张力蛋白4抗体 |
| 13-O-乙酰基马桑宁3,4-Dihydroxybenzoyllupeol | 肿瘤坏死因子α诱导蛋白3相互作用蛋白2抗体 |
| 13-邻去乙酰基红豆杉醇 Z(3,4-Dihydroxy-5-methoxybenzoyl)taraxerol | 稻叶O1血清型霍菌抗体 |
| 13-羟基-8,11,13-罗汉松科三烯-18-酸23,24-Dihydrocucurbitacin F | 轴突蛋白3检测试剂盒 NRXN3 ELISA Kit |
| 14-去氧-11,12-二去氢穿心莲内酯Cucurbitacin V | Streptomyces acidiscabies |
| 15-甲氧基松柏酸Heynic acid | 人类粘蛋白(ORM)检测试剂盒elisa |
| 15-脱氧尤可甾醇Hemsleyacin D | 生长分化因子1(GDF1)ELISA试剂盒 |
| 15-异海松烯-8,18-二醇Sericic acid | Western及IP细胞裂解液SP-A 表面活性蛋白AELISA检测试剂盒 |
| 16-贝壳杉烯-2,6,15-三醇16-Desoxycucurbitacin V | 鸡血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit |
| 血小板反应蛋白解整合素金属肽酶12(ADAMTS12)重组蛋白 | 肾病样蛋白3抗体 |
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文献和实验Cell Lysis/Western/IPSteven Finkbeiner,Departments of Neurology and Physiology,UCSFcompiled by 6/95 by AJS from AB)Fresh 1X LysisFresh 1X LysisFinal5ml10ml2X Lysis 2.5 ml5mlNaCl0.25M0.25ml of 5M0.5 ml of 5MNa3VO40.1mM25l (μl) of 200 mM5l (μl) of 200
其他方法验证更详细的相互作用信息。 图 11:使用抗体进行 Co-IP 与使用 Strep-Tactin®XT 进行pull-down 融合蛋白沉降 pull-down IP 和 Co-IP 通过固定抗体来捕获诱饵蛋白质及其结合分子,而 pull-down 可使用带亲和标签的目的蛋白进行,在体外验证蛋白间的直接相互作用。Pull-down 是通过磁珠/琼脂糖填料固定带有标记的「诱饵」蛋白,从细胞裂解液、纯化蛋白或表达系统中捕获「猎物」蛋白,然后将复合物蛋白分离后进行凝胶或质谱分析,从而确认互作
或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
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