- ￥1290 - 3960
- 帛科
- BK-DB6547
- 国产
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
53
- 英文名：
Recombinant Human S6K protein
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
-20 to -80 °C
- 规格：
50μg、100ug 、1mg
商品介绍：
内毒素: Please contact with the lab for this information.
蛋白构建: A DNA sequence encoding the human S6K (Phe91-Phe352) was fused with His tag
制剂: Supplied as solution form in PBS pH 7.5 or lyophilized from PBS pH 7.5.
运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
分子别名: Ribosomal protein S6 kinase beta-1,S6K-beta-1,S6K1,70 kDa ribosomal protein S6 kinase 1,P70S6K1,p70-S6K 1,Ribosomal protein S6 kinase I,Serine/threonine-protein kinase 14A,p70 ribosomal S6 kinase alpha,p70 S6 kinase alpha,p70 S6K-alpha,p70 S6KA.
背景介绍: PS6K, also known as RPS6KB1, is a serine/threonine-protein kinase. It belongs to the RSK (ribosomal s6 kinase) family. Members of this family function in signal transduction. PS6K is an isoform of p7 ribosomal S6 kinase (S6K). S6K can be activated by mitogenic stimuli such as growth factors, insulin and cytokines. It phosphorylates the ribosomal protein S6. PS6K also phosphorylates other proteins such as elF4B, eEF2K and SKAR. It is a crucial effector of mTOR(rapamycin) signaling. PS6K is dissociated from the EIF3 complex and activated upon mitogenic stimulation, phosphorylation by the mammalian target of mTOR complex 1 (mTORC1). Its active form then phosphorylates and activates several substrates in the preinitiation complex, including the EIF2B complex and the cap-binding complex component EIF4B. PS6K also functions in cell proliferation, cell growth and cell cycle progression.
重组蛋白质的可溶性鉴定：
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质的分离纯化：
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
表达载体在基因工程有以下几种元件：
（1）选择标志的编码序列；
（2）可控转录的启动子；
（3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)；
（4）一个多限制酶切位点接头；
（5）宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达：
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 聚凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
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| 货号 | BK-DB6547 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
| 纯度 | >90% as determined by SDS-PAGE | 预测分子量 | 29.66 kDa |
| 表达宿主 | E.coli | 种属 | Homo sapiens (Human) |
蛋白构建: A DNA sequence encoding the human S6K (Phe91-Phe352) was fused with His tag
制剂: Supplied as solution form in PBS pH 7.5 or lyophilized from PBS pH 7.5.
运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
分子别名: Ribosomal protein S6 kinase beta-1,S6K-beta-1,S6K1,70 kDa ribosomal protein S6 kinase 1,P70S6K1,p70-S6K 1,Ribosomal protein S6 kinase I,Serine/threonine-protein kinase 14A,p70 ribosomal S6 kinase alpha,p70 S6 kinase alpha,p70 S6K-alpha,p70 S6KA.
背景介绍: PS6K, also known as RPS6KB1, is a serine/threonine-protein kinase. It belongs to the RSK (ribosomal s6 kinase) family. Members of this family function in signal transduction. PS6K is an isoform of p7 ribosomal S6 kinase (S6K). S6K can be activated by mitogenic stimuli such as growth factors, insulin and cytokines. It phosphorylates the ribosomal protein S6. PS6K also phosphorylates other proteins such as elF4B, eEF2K and SKAR. It is a crucial effector of mTOR(rapamycin) signaling. PS6K is dissociated from the EIF3 complex and activated upon mitogenic stimulation, phosphorylation by the mammalian target of mTOR complex 1 (mTORC1). Its active form then phosphorylates and activates several substrates in the preinitiation complex, including the EIF2B complex and the cap-binding complex component EIF4B. PS6K also functions in cell proliferation, cell growth and cell cycle progression.
重组蛋白质的可溶性鉴定：
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质的分离纯化：
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
表达载体在基因工程有以下几种元件：
（1）选择标志的编码序列；
（2）可控转录的启动子；
（3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)；
（4）一个多限制酶切位点接头；
（5）宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达：
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 聚凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
公司出售的相关产品：
| RNA结合蛋白18封闭多肽 | 甲基化组蛋白H3(Tri methyl K79)单克隆抗体 |
| 脆性X综合征相关蛋白AFF1封闭多肽 | SLITRK5 Antibody Blocking Peptide |
| T细胞介导的转录调节因子Tbx21封闭多肽 | Recombinant human Fas Ligand protein, N-His (HEK293) |
| FAM59A蛋白封闭多肽 | HSFX1 Antibody Blocking Peptide |
| 周期素D结合蛋白1封闭多肽 | phospho-LKB1 (Ser428) Antibody Blocking Peptide |
| 快速周期调节蛋白PDYE1封闭多肽 | Rbms3 protein Antibody Blocking Peptide |
| 内皮抑素/内皮他丁封闭多肽 | H5N1 Antibody Blocking Peptide |
| 锌指蛋白300封闭多肽 | INSL3 Antibody Blocking Peptide |
| 指甲髌骨综合征相关蛋白NP1封闭多肽 | SCGB2A2 Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化微管相关蛋白封闭多肽 | GRGDS Peptide |
| 亚硫酸盐氧化酶封闭多肽 | PGR Antibody Blocking Peptide |
| DMRTB1蛋白封闭多肽 | FAT1 Antibody Blocking Peptide |
| 上皮细胞粘附分子（CD326）封闭多肽 | Recombinant Human S6K proteinCOMMD8 Antibody Blocking Peptide |
| TNRC6B Antibody Blocking Peptide | |
| nal蛋白封闭多肽 | IL15RA Antibody Blocking Peptide |
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