- ￥1290 - 3960
- 帛科
- BK-DB5475
- 国产
- 2025年07月13日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
60
- 英文名：
Recombinant Salmonella phage LSE7621 LSE7621_00058 protein,C-His Tag
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
-20 to -80 °C
- 规格：
50μg、100ug 、1mg
| 货号 | BK-DB5475 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
| 纯度 | >90% as determined by SDS-PAGE | 预测分子量 | 112.69kDa |
| 表达宿主 | E.coli | 种属 | Salmonella phage LSE7621 |
蛋白构建: A DNA sequence encoding the Salmonella phage LSE7621 LSE7621_00058 (full-length) was fused with the C-His Tag
制剂: Supplied as solution form in PBS, pH7.5,0.02% Sarcosyl or lyophilized from PBS, pH7.5,0.02% Sarcosyl.
运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
表达载体在基因工程有以下几种元件：
（1）选择标志的编码序列；
（2）可控转录的启动子；
（3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)；
（4）一个多限制酶切位点接头；
（5）宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达：
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 聚凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
公司出售的相关产品：
| 周期素B1封闭多肽 | 卷曲螺旋结构域蛋白62抗体 |
| 肌球蛋白6封闭多肽 | 氯化钙通道活性的4抗体 |
| 钠离子通道调节蛋白1封闭多肽 | 三甲基化组蛋白H3抗体 |
| LYRM7蛋白封闭多肽 | 角化蛋白S100A18抗体 |
| CD4封闭多肽 | 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶35抗体 |
| 卷曲螺旋结构域蛋白38封闭多肽 | 14-3-3γ抗体 |
| 淋巴细胞抗原6重复位点蛋白G6F封闭多肽 | MYCNOS蛋白抗体 |
| 生发中心激酶MAP4K2封闭多肽 | 14号染色体开放阅读框174 |
| 谷胱甘肽还原酶封闭多肽 | DNA修复和重组蛋白RAD54B抗体 |
| 富含亮氨酸重复蛋白62封闭多肽 | Cy7标记小鼠抗人CD8单克隆抗体 |
| 5号染色体开放阅读框44封闭多肽 | FCN3蛋白抗体 |
| 环指蛋白166封闭多肽 | 分选连接蛋白9抗体 |
| 表皮生长因子样蛋白6封闭多肽 | Recombinant Salmonella phage LSE7621 LSE7621_00058 protein,C-His Tag环指蛋白165抗体 |
| NADH氧化还原酶辅酶2封闭多肽 | 凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相关抗原抗体 |
| 上皮钙粘附分子结合蛋白E7 | 甲状腺素5'脱碘酶3抗体 |
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质的分离纯化：
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验Recombinant DNA Engineering, Or Cloning Genes In Plasmids
and thus fusion proteins. For example there might be sequence for a fluorescent protein such as GFP or a peptide tag such as HA upstream of MCS (and downstream of promoter) so that an insert in frame will lead to the generation of a fusion protein, an N-terminal
[资源] 申请上传 Current Protocols In Protein Science （60M） 见公共邮箱
5.7 Overview of Protein Expression in Pichia pastoris Unit 5.8 Culture of Yeast for the Production of Heterologous Proteins Unit 5.9 Overview of Protein Expression by Mammalian Cells Unit 5.10 Production of Recombinant Proteins in Mammalian Cells Unit 5.11
separately from each parent (e.g., at a locus for eye color the allele might result in blue or brown eyes). Amino acid: Any of a class of 20 molecules that are combined to form proteins in living things. The sequence of amino acids in a protein and hence protein
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
