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武汉华尔纳生物科技有限公司
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- 英文名:
NP69人永生化鼻咽上皮细胞
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- 种属:
人
- 生长特性:
贴壁细胞
- 细胞类型:
肿瘤细胞
- 产品名称:
NP69人永生化鼻咽上皮细胞
NP69(人永生化鼻咽上皮细胞)
| 一、细胞基本属性 |
|
| 细胞名称 |
NP69(人永生化鼻咽上皮细胞) |
| 细胞别称 |
NP69SV40T; NP-69 |
| 细胞货号 |
ORC1233 |
| 种属来源 |
鼻咽; SV40转化;男性 |
| 生长特性 |
贴壁细胞 |
| 细胞形态 |
上皮细胞样 |
|
背景简介 |
NP69细胞来源于用含有SV40大T抗原的PX8质粒转染的活检分离的原代鼻咽上皮细 胞的P1代培养物。 NP69细胞保留了正常鼻咽细胞的许多特征 ,包括角蛋白谱和对 TGF- β的反应 , 同时具有在NPC中观察到的许多遗传特征。 NP69细胞是非致瘤性 的 ,并且表现出贴壁依赖性生长。 NP69细胞对于研究病毒相关肿瘤发生的机制特 别有用。 |
| 生物安全等级 |
1 |
| 细胞规格 |
1 × 106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 |
| 支原体检测 |
无 |
| 培养基 |
T25瓶10-12ml ; 10cm皿12-15ml |
| 培养条件 |
空气 ,95% ; 二氧化碳 (CO2) , 5% |
| 冻存液配方 |
92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 |
200-300万/ml , 1ml每管 |
| 倍增时间 |
~12-30小时 |
|
冻存方法 |
1.消化并离心获得细胞沉淀后 ,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞; 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管; 3.将冻存管转入程序冻存盒 ,放入-80度冰箱过夜 ,第二天转入液氮保存;没有程序 冻存盒的实验室 ,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min ,再-20 度静置2h后转入-80度过夜 ,第二天转入液氮保存 |
| 换液周期 |
2~3天 |
|
传代方法 |
1.尽量吸干净T25瓶原培养基; 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s ,吸走润洗的PBS; 3.T25瓶加1ml左右胰酶 ,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层; 4.将培养瓶放入37度培养箱消化; 5.消化到细胞间隙变大 ,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化; 6.混匀细胞 ,900rpm离心3-5min ,弃上清; |
|
|
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞 ,均匀分到新的培养瓶里; 8.补足完全培养基 ,将培养瓶放回培养箱静置培养; |
|
|
H-2d |
| 注意事项 |
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性 ,若有异常 ,及时调整实验方 案 |






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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
实验材料: 1. 一般来自鼻咽癌活检组织或引产胚胎的鼻咽组织; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养基:可使用ROMI1640培养液,添加20%胎牛血清、5μg/ml胰岛素、2.7×10-7 mol/L氢化可的松。也可用DMEM培养液; 4. 低血清培养液与无血清培养液:基础培养液均为DMEM/F12(1:1,V/V)混合液。配置时,添加1.2g/L
株被错误鉴定和交叉污染,NIH 和 ATCC 近两年都对此发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。一些权威杂志在作者投稿时就要求提供细胞株的 STR 基因型鉴定证明。鉴达推出的细胞 STR 鉴定服务并与多家研究机构、细胞中心、生产厂商等建立长期合作关系。现行技术科同时分析多个 STR 基因座,可以准确的判断交叉污染和细胞类型。微量样本即可满足检测需求,并且可以检测到早期污染。怎么样?这些工具有没有帮到你呢?






