血管内皮生长因子D(VEGFD)真核蛋白

噬菌体：首尾相接，总长可达两亿光年

区)可供外源序列插入或替换。目前，PV系统已成功展示了有活性的大分子蛋白Β-半乳糖苷酶(465 ku)和植物外源凝血素BPA(120 ku)等。λ噬菌体的装配在细胞内进行，故可以展示难以分泌的肽或蛋白质。该系统展示的外源蛋白质的拷贝数平均为1个分子/噬菌体，这表明外源蛋白质或多肽可能干扰了λ噬菌体的尾部装配。 D蛋白展示系统 D蛋白的分子质量为11 ku，参与野生型λ噬菌体头部的装配。低温电镜分析表明，D蛋白以三聚体的形式突出在壳粒表面。当突变型噬菌体基因组小于野生型基因组的82%时，可以在缺少D

蛋白质组学同位素标记的亲和标签方法

的，所以在每一个肽上都可以完成相对定量。一旦发现一对呈现“差别表达”的肽，就可以明确地进行串联质谱来鉴定此肽。 这种技术产生的数据比MuDPIT方法得到的数据少，能够直接相对定位二元比较的肽。由于14％的真核蛋白质没有半胱氨酸残基，这使得这项技术不适用于这些蛋白质。对于基于2D―PAGE的方法难以处理的小的、大的、酸性的、碱性的和疏水的蛋白质，这项技术与MuDPIT方法比基于2D―PAGE的方法有相似的优势。它们也有某些共同的劣势，如不能获得完全蛋白质的信息、处理过程的信息、翻译后修饰的信息以及混合物中

在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略

差别以及蛋白质对宿主的潜在毒性等等。但知识的大量积累还是有助于为表达方面某些特定的困难提供一般的解决方法。 大肠杆菌作为表达系统的主要障碍包括：不能象真核蛋白那样进行翻译后修饰、缺乏将蛋白质有效释放到培养基中的分泌机制和充分形成二硫键的能力。 另一方面，许多真核蛋白在非糖基化的形式下能保留其生物学活性，因而也就可以用大肠杆菌来表达。 如何实现外源基因在原核细胞中的有效表达，自60年代以来，对影响外源基因在其表达体系中表达效率的各个因素作了大量实验研究，并有多篇归纳性综述