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武汉华尔纳生物科技有限公司
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- 英文名:
大鼠肠平滑肌细胞
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- 组织来源:
小肠组织
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 传代特性:
5代左右;3代以内状态最佳
- 种属来源:
大鼠
- 产品名称:
大鼠肠平滑肌细胞
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
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一、细胞基本属性
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细胞名称
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大鼠肠平滑肌细胞
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组织来源
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小肠组织
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商品货号
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ORCR029
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种属来源
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大鼠
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产品规格
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5×105cells/T25细胞培养瓶
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细胞简介
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大鼠小肠平滑肌细胞分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,粘膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力,促使食物向下运动。小肠平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。小肠平滑肌肉瘤是起源于小肠壁肌层、黏膜下肌层和肠壁血管平滑肌的恶性肿瘤,是小肠结缔组织恶性肿瘤中最常见的一种。因此,体外小肠平滑肌细胞的培养对研究小肠平滑肌肉瘤提供了基础和前提。此外,体外培养细胞,由于影响因素较为单一,是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。
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培养基
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含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
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换液频率
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每2-3天换液一次
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生长特性
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贴壁
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细胞形态
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成纤维细胞样
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传代特性
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5代左右;3代以内状态最佳
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消化液
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0.25%胰蛋白酶
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%
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文献和实验一、摘要 目的:建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法:成年新西兰白兔两只(正常及梗阻各一只),采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养,观察细胞形态和扩增情况,用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果:倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞
组织化学染色。(α-SM-actin免疫组织化学鉴定)胰酶消化法培养平滑肌细胞1.1 试剂和动物胰酶购自Sigma公司;α-actin抗体购自中山生物技术有限公司;PBS液各成分均为市售分析纯;新生小牛血清购自HyClone;DMEM为Gibco产品。雄性Wistar大鼠(2只,体重175±25 g)购自中国医学科学院实验动物中心。1.2 胰酶消化法原代培养Wistar大鼠处死,迅速取出胸主动脉,浸泡在含无菌PBS的表面皿中,转移到无菌超净台。在表面皿中漂洗主动脉去除残留的血迹,纵向剪开主动脉,把主动脉铺平
培养液:MEM(GIBCO),20%FBS,双抗100IU/ml; 原代细胞培养:取5kg左右兔空气栓塞法处死后断头,于无菌条件下从枕大孔处用大止血箝扳开颅骨暴露并小心取出脑组织放入装有DMEM的培养皿中,用眼科镊分离基底动脉后按常规平滑肌方法贴块培养。 传代: (1)吸除培养瓶内旧培养液。 (2)D-Hanks液冲洗2遍。 (3)加入消化液少许,以能覆盖瓶底为限。 (4)倒置显微镜观察发现细胞胞质回缩、细胞间隙增大时,立即终止消化。 (5)吸除消化液,向瓶底注入D-Hanks液






