缓激肽受体B2(BDKRB2)重组蛋白

在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略

各有缺点。近来这一问题通过将来自B.subtilis编码醋酸盐合成酶的alsS基因导入E.coli细胞中得以解决[141]。该酶催化丙酮酸转化为非酸性和低毒性的副产品。乙酸积累的减少极大地改善了重组蛋白的产生。另外，其他酶缺陷的E.coli突变株也已经建立，这些突变株产生较少的乙酸，从而提高了人重组蛋白的表达水平[214]。 总结 一种高效的原核表达载体需要包括一个强大并且可以严紧调节的启动子；一位于翻译起始密码子5’端大约9bp的SD序列；位于目的基因3’末端的一个高效转录终止子。除此之外

原创:下游纯化简易讲义

及0-2 mol/L 硫酸铵中的稳定性； c、测定样品在0-50%乙醇、甲醇中的稳定性； d、测定样品在4-40℃的稳定性； e、室温下静置过夜，测定对蛋白水解酶的稳定性。 （2）样品预处理 a、去除样品中颗粒物（0.45-0.22微米膜过滤或者10000 g离心15分钟） b、去除样品中脂类（ 10000 g离心15分钟或有机溶剂抽提） c、去除样品中核酸（加入核酸酶消化或者使核酸沉淀） d、抑制样品中蛋白水解酶（加入蛋白酶抑制剂、低温下快速第一步分离或在蛋白酶缺陷宿主中表达重组蛋白

在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的全攻略

乙酸形成降低发酵罐的混合效率和产热等。有关这些问题的解决方案已经有详细的介绍[193]。利用高细胞密度培养系统生产重组蛋白质的一个主要问题是乙酸的积累，这种亲脂性成分对细胞的生长是有害的[193]。虽然有多种解决这一问题的方案，但是均各有缺点。近来这一问题通过将来自B.subtilis编码醋酸盐合成酶的alsS基因导入E.coli细胞中得以解决[141]。该酶催化丙酮酸转化为非酸性和低毒性的副产品。乙酸积累的减少极大地改善了重组蛋白的产生。另外，其他酶缺陷的E.coli突变株也已经建立，这些突变