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- cloud-clone corp(优尔)
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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Recombinant Retinol Binding Protein 4 (RBP4)
- 库存：
100
- 供应商：
杭州昊鑫生物
- 规格：
10ug
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文献和实验tracrRNA/crRNA 复合物，引导核酸酶 Cas9蛋白在与crRNA 配对的序列靶位点剪切双链DNA。细胞通过自身的同源重组或者非同源重组机制修复受损的双链DNA，从而达到基因敲除的目的。研究者通过改造形成更加简洁的具有引导作用的sgRNA（short guide RNA），也能够引导Cas9对DNA的定点切割。 ▲ Cas/gRNA复合体结构及基因剪切机制 主要流程 寻找靶基因中合适的gRNA序列 ↓ 设计单链oligo序列，退火形成
特异性的选择主要需要考虑四个方面：蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、标记物的特异性。 （1）蛋白特异性 针对需要检测的蛋白查找抗体，几个细节要区分，重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测，对抗体的要求是不一样的，注意查看抗体说明书的检测说明。如果重组蛋白不是全长表达，则需要注意抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。内源性蛋白最好能清楚其剪切与修饰的方式，特殊表型的蛋白需要进行序列比对，并结合抗体免疫原序列，查看交叉反应的情况。磷酸化蛋白检测需要确定具体位点，不同位点的磷酸化意味
的表达系统会造成质粒的不稳定，细胞生长速度的下降和重组蛋白产量的降低[32，33]。Lanzer和Bujard曾对常用的lac启动子-操纵子系统进行了广泛的研究，证明操纵子放在启动子序列的不同位置会造成70倍差异的抑制。将17bp的操纵子置于-10和-35六聚体区之间所形成的抑制比将其放在-35区的上游或-10区的下游要高50-70倍[34]。 启动子的第三个特性是其简便和廉价的可诱导性。大量生产蛋白质最常用的启动子是热诱导（λPL）和化学诱导(trp)启动子。异丙基硫代-β-D-半乳糖
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