- ￥2090 - 5290
- 华尔纳生物
- N-64443
- 武汉
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详询
- 细胞类型：
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- 肿瘤类型：
详询
- 供应商：
武汉华尔纳生物科技有限公司
- 库存：
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- 生长状态：
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- 年限：
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- 运输方式：
快递
- 器官来源：
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- 是否是肿瘤细胞：
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- 细胞形态：
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- 免疫类型：
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- 物种来源：
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- 相关疾病：
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- 组织来源：
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- 英文名：
人胃成纤维细胞
细胞代次低，活性高，品质保证，提供全程7*24小时专业技术指导售后服务 （养不活无理由全额退款）
- 细胞形态：
成纤维样细胞
- 组织来源：
胃组织
- 种属来源：
人
- 规格：
5×10⁵Cells/T25培养瓶
- 传代特性：
细胞特性确定传代
- 产品名称：
人胃成纤维细胞
| 一、细胞基本属性 | |
| 细胞名称 | 人胃成纤维细胞 |
| 组织来源 | 胃组织 |
| 商品货号 | ORCH423 |
| 种属来源 | 人 |
| 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
|
细胞简介
|
胃是人体的消化器官，位于膈下，胃壁由黏膜、黏膜下层、肌层和外膜四层组成 ，并有神经、血管和淋巴管的分布。其中成纤维细胞主要分布于粘膜层中的固有 层、黏膜下层和外膜层。 成纤维细胞是结缔组织中最常见的细胞， 电镜下， 成纤 维细胞胞质内可见丰富的粗面内质网、游离核糖体和高尔基复合体，表明其具有 合成和分泌蛋白质的功能。己知成纤维细胞的主要功能之一是合成胶原蛋白及其 他细胞外基质， 在组织器官纤维化过程中发挥重要作用。 |
| 培养基 | 原代成纤维细胞培养体系 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁培养 |
| 细胞形态 | 成纤维样细胞 |
| 传代特性 | 细胞特性确定传代 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相： 空气，95%；CO2 ，5% |
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
在技术部标准操作流程下，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 悬浮细胞处理
1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中，用PBS清洗细胞培养瓶1-2次，收集清洗液；
2)1200-1500rpm离心3min，弃上清，收集细胞沉淀；
3)加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞；将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中，置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)若遇到悬浮细胞团块较大，无法机械吹散时，向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中，用吸-管轻轻吹打混匀，37°C温浴2-3min，消化结束后，加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化，用吸管轻轻吹打，分散细胞；1200rpm离心5min，弃上清，收集细胞沉淀；
5)加入5ml新鲜完全培养基，用吸管轻轻吹打混匀；按传代比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
6)待细胞状态稳定后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
4. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验Cancer Cell：中山大学刘卓炜团队揭示膀胱癌成纤维细胞新亚群介导肿瘤干性和化疗抵抗
Promote Cancer Stemness via WNT5A in Bladder Cancer 的研究成果，该研究在膀胱癌组织中首次鉴定出一类高表达尿素转运子（SLC14A1）的成纤维细胞新亚群。证实了干扰素信号可以诱导这一亚群的分化，并通过分泌 WNT5A 活化肿瘤细胞 β-catenin 蛋白及其下游通路，从而增强肿瘤干性和介导化疗抵抗。研究人员通过单细胞测序对膀胱癌患者的肿瘤组织和配对癌旁组织中的成纤维细胞进行了无监督聚类。除了常见的 iCAF 和 mCAF 外，还发现了一类 SLC
一、原代细胞的培养与维持1、静置贴壁细胞（包括半贴壁细胞的培养）凡经消化液处理实体组织来源的细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性，细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L,培养基可用Eagle（MEM）或DNEM培养，小牛血清浓度为10%~80%。在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮。贴壁细胞长成网状或基本单层时，由于营养缺乏，代谢产物增多，pH变酸，不适宜细胞生长，此时细胞还未长成单层，未达到饱和密度，仍需继续培养，因此，需采取换液方式来更新
组织应加入含10%二甲基亚砜的培养基，按细胞冻存方式于液氮中冷冻保存。（2）取材应严格无菌 所取标本材料应在无菌条件下进行，为了确保无菌，对所取材料若疑有污染的可能，应将所取组织在含高浓度抗菌素（400单位/mL）甚至加入适量的两性霉素B或10%达克宁液的培养液内于4℃下存放2小时以上，再用PBS洗2~3次，以确保所取材料无菌。要用无菌包装的器皿或事先消毒好的带少许培养液（内含400单位/mL抗菌素）的小瓶等便于携带的物品来取材，所取材料应避免接触有毒有害的化学物质，如碘、汞等。（3）取材和原代细胞
