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武汉华尔纳生物科技有限公司
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- 英文名:
人冠状动脉平滑肌细胞
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- 传代特性:
可传5代左右;3代以内状态最佳
- 产品名称:
人冠状动脉平滑肌细胞
- 组织来源:
冠状动脉
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 种属来源:
人
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
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一、细胞基本属性
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细胞名称
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人冠状动脉平滑肌细胞
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组织来源
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冠状动脉
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商品货号
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ORCH281
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种属来源
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人
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产品规格
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5×105cells/T25细胞培养瓶
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细胞简介
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人冠状动脉平滑肌细胞分离自冠状动脉组织;冠状动脉是供给心脏血液的动脉,起于主动脉根部,分左右两支,行于心脏表面。采用Schlesinger等的分类原则,将冠状动脉的分布分为三型:右优势型、均衡型、左优势型。左右冠状动脉是升主动脉的第一对分支。左冠状动脉为一短干,发自左主动脉窦,经肺动脉起始部和左心耳之间,沿冠状沟向左前方行后,立即分为前室间支和旋支。前室间支沿前室间沟下行,旋支绕过心尖切迹至心的膈面与右冠状动脉的后室间支相吻合。它是构成冠状动脉壁的主要细胞成分,细胞膜上分布着多种离子通道,如电压依赖性Na+通道、多种Ca2+通道和K+通道;它们参与了静息电位的维持与细胞膜电位的复极化、超极化,调节血管平滑肌的收缩及舒张功能,此外动脉粥样硬化的发展也涉及冠状动脉平滑肌细胞增殖、炎症及凋亡等。因此,原代分离培养的冠状动脉平滑肌细胞,对研究生理和病理状态下离子通道及血管张力变化机制具有非常重要的作用。冠状动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
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包被条件
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培养基
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含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
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换液频率
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每2-3天换液一次
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生长特性
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贴壁
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细胞形态
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成纤维细胞样
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传代特性
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可传5代左右;3代以内状态最佳
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消化液
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0.25%胰蛋白酶
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%
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文献和实验一、摘要 目的:建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法:成年新西兰白兔两只(正常及梗阻各一只),采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养,观察细胞形态和扩增情况,用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果:倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞
组织化学染色。(α-SM-actin免疫组织化学鉴定)胰酶消化法培养平滑肌细胞1.1 试剂和动物胰酶购自Sigma公司;α-actin抗体购自中山生物技术有限公司;PBS液各成分均为市售分析纯;新生小牛血清购自HyClone;DMEM为Gibco产品。雄性Wistar大鼠(2只,体重175±25 g)购自中国医学科学院实验动物中心。1.2 胰酶消化法原代培养Wistar大鼠处死,迅速取出胸主动脉,浸泡在含无菌PBS的表面皿中,转移到无菌超净台。在表面皿中漂洗主动脉去除残留的血迹,纵向剪开主动脉,把主动脉铺平
培养液:MEM(GIBCO),20%FBS,双抗100IU/ml; 原代细胞培养:取5kg左右兔空气栓塞法处死后断头,于无菌条件下从枕大孔处用大止血箝扳开颅骨暴露并小心取出脑组织放入装有DMEM的培养皿中,用眼科镊分离基底动脉后按常规平滑肌方法贴块培养。 传代: (1)吸除培养瓶内旧培养液。 (2)D-Hanks液冲洗2遍。 (3)加入消化液少许,以能覆盖瓶底为限。 (4)倒置显微镜观察发现细胞胞质回缩、细胞间隙增大时,立即终止消化。 (5)吸除消化液,向瓶底注入D-Hanks液






