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- mlBio/酶联生物
- ml-G13050
- 国内
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 库存：
459
- 英文名：
293T-EGFP细胞
- 运输方式：
快递运输
- 规格：
1*10^6
| 细胞名称 |
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| 细胞品牌 |
酶联生物 |
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| 细胞英文 |
293T-EGFP细胞 |
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| 细胞规格 |
1*10^6 |
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| 细胞冻存 |
液氮冻存 |
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| 干冰运输 |
2ml冻存管 |
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| 活细胞运输 |
T25瓶 |
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| 培养基 |
冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO |
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| 供应范围 |
仅限于科研实验使用，不可作为其它用途 |
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| 存接收后处理 |
干冰运输，收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏 |
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| 收到细胞后,发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照与我们联系 |
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| 复苏接收后处理 |
收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊 |
如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们 |
| 75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片 |
若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。 |
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| 建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理 |
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| 您收到细胞3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务 |
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文献和实验本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂，它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物，是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。 三、实验材料与器材 1、材料 293T细胞 MyoD表达质粒和EGFP表达质粒 DMEM培养基 链霉素/青霉素（双抗） FCS（小牛血清） PBS（磷酸盐缓冲溶液） 胰酶/EDTA消化液 转染试剂（TransFast2、器材 20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip头 酒精
( nonhomologous end-joining) 修复重新连接 DNA，造成靶点附近 DNA 序列缺失突变。 Cas9 切割原理: 2、pTYNE 载体靶点验证原理：将包括靶点在内的大约 200bp 基因组序列克隆到 pTYNE 载体。构建好的 pTYNE 载体与 pCas9/gRNA1 基因敲除载体共转染 293T 细胞。如果靶点有效，基因敲除载体对 pTYNE 载体载体切割，经过细胞修复后 pTYNE 上移码突变的 EGFP 基因得到修复，发出绿色荧光。 3、阳性细胞筛选原理
包装细胞293T细胞的培养一、293T细胞的冻存1. 随着传代的次数增加，293T细胞会出现生长状态下降，出现突变等。所以要在细胞购进时就进行大量冻存，以保证实验的稳定性和持续性。2. 在细胞对数生长期进行冻存，增加细胞复苏成活率。3. 倒去细胞上清液，加入D-Hank's液洗去残留的培养基。4. 加入0.25%的胰酶，消化10-20s后倒去。5. 镜下观察细胞变圆，细胞间间隙加大时，加入新鲜培养基吹打混匀。6. 细胞计数。7. 将细胞离心，1000rpm，2min。8.根据计数结果加入
