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53
- 英文名:
Yeast Nitrogen Base(with AS, without AA)
- 供应商:
上海联祖
- 规格:
100g|500g|100g×10|5kg|500g×10
英文名称:Yeast Nitrogen Base(with AS, without AA)
产品规格:100g|500g|100g×10|5kg|500g×10
发货周期:1~3天
产品价格:询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ5350 | 100g|500g|100g×10|5kg|500g×10 | 1~3天 | 仅供科研实验 |
产品组分
YNB(含硫酸铵,不含氨基酸) 100g 500g 100g×10
说明书 1份
保存:室温,有效期3年。
注意事项
YNB成分比较复杂,多为易吸潮的盐分,称取完后已及时旋紧瓶盖,并置于干燥避光处储存。严重结块后应废弃不再使用。
YNB配制10×溶液,溶解速度较慢,如需加快溶解速度,可加入适量盐酸加快溶解,待完全溶解后,再用调至合适pH值。
单独配制YNB
称取6.7g YNB加纯水至1L,搅拌溶解,为1×YNB溶液,溶液澄清呈无色至淡黄色,常温pH5.4±0.2@25℃;
称取67g YNB加纯水至1L,搅拌溶解,为10×YNB溶液,溶液澄清呈黄色。
配制培养基
称取6.7g YNB(毕赤酵母一般为13.4g/L),以及相应量的碳源、氨基酸、琼脂或其它补充营养成分,混匀,pH调至所需(多为5.8),121℃高压灭菌15分钟。
也可配制10×YNB溶液,0.2μm孔径滤器过滤除菌,以保证生物素在内有机物避免高压灭菌遭到破坏,培养基的其它成分(预调pH值)高压灭菌后冷却至60℃加入10×YNB溶液。
培养基的计数方法:
一、稀释涂布平板法(亦称活菌计数法)是一种常用的微生物计数方法,其原理是当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便,适用于菌体大小和质量都相近的类群,如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌,但可以估算出1mL培养中液中细胞个数,计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌,因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。
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培养基操作步骤:
一、用法:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。
二、配料:首先,根据培养基的配方,准确称量各种成分,包括粉状和非粉状的成分,如肉膏等,放入烧杯中。
三、溶化:向烧杯中加入适量的水,然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基,应注意防止外溢,并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH:在培养基溶解均匀并冷却至室温后,使用pH试纸测量pH值,然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤:使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤,以去除杂质。
六、分装:将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内,确保管(瓶)口塞上棉塞,以防止外界微生物污染。
七、灭菌:对分装好的培养基进行灭菌处理,通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定:灭菌后的培养基可以进行质量检定,以确保其符合使用要求。
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文献和实验6.0磷酸钾 1.34%YNB 4×10-5%生物素 0.5%甲醇 1. 灭菌700ml 水, 2. 冷至室温,加入下列:100ml 1M pH6.0磷酸钾缓冲液, 100ml 10×YNB, 2ml 500×B, 100ml 10×M 3. 放置于4 度,可放2 个月 10×YNB (13.4%酵母氮源碱(YNB)含硫酸铵不含氨基酸) 溶解134gYNB于1000ml水中,过滤除菌,加热至YNB 完全溶解,存于4 度。或者用34gYNB(不含硫酸铵
形成孢子,在条件适合时再萌发。 培养酵母最适pH 值为pH4.5-5.0。最适生长温度一般在28℃~30℃之间。 我做的试验主要是酿酒酵母,不知楼主做的那个菌属。用到的培养基有: 酵母完全培养基YPD:酵母提取物10g,蛋白陈20g,葡萄糖20g,定容至1L。加入1.5%琼脂 粉则成为固定培养基。 SC(合成完全培养基)培养基(用于筛选酵母转化子):YNB(不含氨基酸的酵母氮源) 6.7g,葡萄糖20g,加入相应的氨基酸,定容至1L。加入
的试验主要是酿酒酵母,不知楼主做的那个菌属。用到的培养基有:酵母完全培养基YPD:酵母提取物10g,蛋白陈20g,葡萄糖20g,定容至1L。加入1.5%琼脂粉则成为固定培养基。SC(合成完全培养基)培养基(用于筛选酵母转化子):YNB(不含氨基酸的酵母氮源) 6.7g,葡萄糖20g,加入相应的氨基酸,定容至1L。加入1.5%琼脂粉则成为固定培养基。由于葡萄糖和氨基酸,灭菌是用115度,30min的灭菌条件。液体摇菌时一般在30度下摇24-30min,就可以,固体培养一般在30度下要3-5天。
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