兔间质干细胞成脂诱导分化与染色试剂盒

中文名称：兔间质干细胞成脂诱导分化与染色试剂盒
英文名称：Rabbit MSC Adipogenic differentiation kit
产品规格：2×200ml
发货周期：1～3天
产品价格：询价

货号	规格	发货期	用途
LZ-PYJ5250	2×200ml	1～3天	仅供科研实验

本试剂盒可用于兔骨髓、脂肪等组织来源的间充质干细胞的成脂诱导分化与染色，兼容诱导分化过程中的其他检测，如mRNA检测、蛋白表达检测、免疫组化检测等。
间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）是中胚层来源的多能干细胞，具有高度自我更新能力和多项分化潜能，体外在一定的条件下可以被诱导分化成脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞。2006年国际细胞治疗协会（ISCT）将此三项检测指标确定为MSC鉴定的必检项目，以MSC为基础的研究报道均会对此三项指标进行鉴定。
在成脂分化作用下，MSC会先后诱导分化为前成脂细胞（preadipocytes）和脂肪细胞（adipocytes），后者聚集着大大小小的脂肪滴（lipid droplets）。油红O在脂肪中的溶解度大于其在染液中的溶解度，因而使脂肪着色，呈现红色或橘红色。被染色的脂肪滴数量和深度会受到多种因素的影响，例如细胞类型、细胞代数、分化时间和培养条件等。兔间充质干细胞成脂诱导分化与染色试剂盒包括成脂诱导培养体系所有成分以及鉴定所用的油红O染色液，提供了一种稳定有效的将兔间充质干细胞诱导分化成脂的方法。
诱导分化程序简单便捷。
诱导成脂细胞效率高。
提供诱导培养基及添加物、染色液等全套试剂。
保存：2～8℃，避光，避免反复冻融，收到后请按标签标示分开保存，有效期1年。
注意事项
本产品所有产品组分均为无菌包装，在使用过程中请注意无菌操作，避免微生物污染。
解冻后的血清出现少量絮状沉淀为正常现象，这些物质对产品质量无影响。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
一、兔间充质干细胞成脂诱导分化培养基A液的配制
2～8℃解冻一份兔间充质干细胞成脂分化专用血清、双抗、重组人胰岛素，室温解冻IBMX、罗格列酮、地塞米松，至完全溶解，轻晃摇匀；
用75%乙醇擦拭消毒试剂盒中各瓶/管表面。
将一份专用血清、双抗、重组人胰岛素、IBMX、罗格列酮、地塞米松全部加入一份恢复至室温的成脂诱导分化基础培养基中。可以吸取少量基础培养基润洗各管1～2次，尽量将所有产品组分全部加入到基础培养基中。
轻轻颠倒摇晃配制好的兔间充质干细胞成脂诱导分化培养基A液，使其混合均匀。
注意：试剂盒中包含2份基础培养基、专用血清、双抗、重组人胰岛素，只取其中1份用于本次配制。


培养基的计数方法：
一、稀释涂布平板法（亦称活菌计数法）是一种常用的微生物计数方法，其原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便，适用于菌体大小和质量都相近的类群，如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌，但可以估算出1mL培养中液中细胞个数，计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌，因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。


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3%氯化钠碱性蛋白胨水  3%NaCl Alkaline Peptone Water  250g
培养基操作步骤：
一、用法：称取本品33.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，备用。
二、配料：首先，根据培养基的配方，准确称量各种成分，包括粉状和非粉状的成分，如肉膏等，放入烧杯中。
三、溶化：向烧杯中加入适量的水，然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基，应注意防止外溢，并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH：在培养基溶解均匀并冷却至室温后，使用pH试纸测量pH值，然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤：使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤，以去除杂质。
六、分装：将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内，确保管（瓶）口塞上棉塞，以防止外界微生物污染。
七、灭菌：对分装好的培养基进行灭菌处理，通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定：灭菌后的培养基可以进行质量检定，以确保其符合使用要求。