- ￥1800
- gelatins/江蓝纯
- JC_CC2686
- 国内
- 2025年07月11日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
WM-3211; WM 3211; WC00045; EST79
- 生长状态：
贴壁生长
- 运输方式：
快递运输
- 细胞形态：
成纤维细胞样
- 物种来源：
人
- 组织来源：
淋巴结
- 规格：
1×10⁶cells/T25培养瓶
| 一、基本信息 |
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| 细胞名称 |
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| 细胞品牌 |
江蓝纯生物 |
| 细胞规格 |
1×10⁶cells/T25培养瓶 |
| 细胞简介 |
WM3211是一种具有转移能力的肿瘤原发性（VGP）黑色素瘤细胞系。这些细胞在培养过程中呈现成纤维细胞的形态。这个细胞系是从一个34岁女性的转移部位（淋巴结）建立的。该细胞系含有c-KIT基因576位的L576P突变。L576P突变导致试剂盒576位氨基酸替换，从亮氨酸（L）到脯氨酸（P）。这种突变发生在膜旁区。突变KIT蛋白在体外可提高激酶活性和转化活性。该细胞系是BRAF、PTEN、N-RAS和CDK4的野生型。将WM3211细胞注射到免疫功能低下的小鼠体内，可产生异种移植瘤。 |
| 细胞英文 |
WM-3211; WM 3211; WC00045; EST79 |
| 细胞来源 |
JCRB |
| 种属来源 |
人 |
| 性 别 |
女 |
| 年 龄 |
34 |
| 组织来源 |
淋巴结 |
| 支原体检测 |
荧光法（-） |
| 细胞形态 |
成纤维细胞样 |
| 生长特性 |
悬浮生长 |
| 传代方法 |
1：3至1：6，每周2次 |
| 生长条件 |
气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37℃ |
| 培 养 基 |
2%HI-FBS肿瘤专用培养基 |
| 冻存条件 |
95% 培养基+5% DMSO，液氮储存 |
| 发货方式 |
快递运输(特殊情况的另处理) |
| 供应范围 |
仅用于科研使用，不得用于其它用途 |
| 二、接受后处理 |
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| 处理1 |
收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们 |
| 处理2 |
请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h |
| 处理3 |
弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基 |
| 处理4 |
如果细胞密度达80%-90%请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司的完全培养基 |
| 处理5 |
接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系 |
| 三、细胞操作 |
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| 复苏细胞 |
将含有1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代
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如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养: |
| 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 |
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| 2. 加 1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 |
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| 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。 |
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| 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
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| 细胞冻存 |
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类: |
| 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 |
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| 2. 4 min 1000rpm离心去掉上清。加1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10⁶/ml，每支冻存管冻存1ml 细胞悬液，注意冻存管做好标识。 |
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| 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
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| 注意事项 |
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。 |
| 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。 |
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| 3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 |
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| 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细胞汇合度80%左右时正常传代。 |
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| 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养，培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。 |
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文献和实验黑色素瘤（melanmoa）又称为恶性黑色素瘤，是一种能产生黑色素的高度恶性肿瘤，大多见于30岁以上成人，发生于皮肤者以足底部和外阴及肛门周围多见，可以一开始即为恶性，但通常由交界痣恶变而来。凡黑痣色素加深、体积增大、生长加快或溃破、发炎和出血等常是恶变的象征。此瘤也可发生于粘膜和内脏器官。黑色素瘤的组织结构呈多样性，瘤细胞可呈巢状、条索状或腺泡样排列。瘤细胞可呈多边形或梭形，核大，常有粗大的嗜酸性核仁，胞浆内可有黑色素颗粒。也有胞浆内没有黑色素颗粒的黑色素瘤，称为无黑色素性黑色素瘤
广义的是指连续继代的细胞系。一如海拉细胞（ HeLa cell）株那样，已成为习惯的用法；所谓“株”，是意味着培养细胞获得无限性的增殖，形成连续继代的细胞系。然而正确地来说，是指由选择或纯系化所分离的具有特异性态或遗传标记的培养细胞系。在这个定义下，当记载细胞株时，如胸苷激酶缺失 L细胞株那样，而明确记载其特异性是必要的。
呈黑色或黑褐色的高度恶性的肿瘤。多从皮肤、眼球、脑脊髓膜等生理上有黑色素（ melanin）存在的组织发生。生长甚快，易转移到淋巴结、肝脏等处，且易再发。不仅见于老年，青年也有大致相同的发病率。主张起源于中胚叶的学者使用黑色肉瘤（德 Melanosarkom）这一名称；此外，如果呈现上皮性排列时则称为黑色素癌（德 Melanokarzinom）。在肿瘤组织内氧化的酪氨酸以二羟基吲哚（ dihydroxyindole）和多巴（ dopa）从尿中排出，形成黑色素，而表现为黑色
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