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- 联祖
- LZ-PYJ3316
- 国产
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
10% NaCl Trypticase Soy Broth
- 供应商：
上海联祖
- 规格：
10个/包
英文名称：10% NaCl Trypticase Soy Broth
产品规格：10个/包
发货周期：1～3天
产品价格：询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ3316 | 10个/包 | 1～3天 | 仅供科研实验 |
培养基操作步骤：
一、用法：称取本品33.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，备用。
二、配料：首先，根据培养基的配方，准确称量各种成分，包括粉状和非粉状的成分，如肉膏等，放入烧杯中。
三、溶化：向烧杯中加入适量的水，然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基，应注意防止外溢，并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH：在培养基溶解均匀并冷却至室温后，使用pH试纸测量pH值，然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤：使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤，以去除杂质。
六、分装：将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内，确保管（瓶）口塞上棉塞，以防止外界微生物污染。
七、灭菌：对分装好的培养基进行灭菌处理，通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定：灭菌后的培养基可以进行质量检定，以确保其符合使用要求。
如何配置培养基：
1、配制溶液
向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。
2、调节pH值
用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。
3、过滤
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。
4、分装
已过滤的培养基应进行分装。如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。
5、加棉塞
分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
6、制作斜面培养基和平板培养基
培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，须趁培养基未凝固时进行。
培养基的计数方法：
一、稀释涂布平板法（亦称活菌计数法）是一种常用的微生物计数方法，其原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便，适用于菌体大小和质量都相近的类群，如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌，但可以估算出1mL培养中液中细胞个数，计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌，因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。
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文献和实验小鼠腹水及单细胞悬液制备流程 配制 6% 淀粉肉汤。 6% 淀粉肉汤配制方法：牛肉膏 0.3g、蛋白胨 1.0g、氯化钠 0.5g、蒸馏水 100mL，上述材料混合加热后加入可溶性淀粉 6.0g；溶解后，121℃ 高压灭菌 15~20 min，EP 管分装封口，将肉汤放置于 4℃ 保存。 小鼠腹腔注射 1mL 6% 淀粉肉汤（注意避开肠管和内脏），刺激 60~72h。 颈椎脱臼法处死小鼠，用 75% 酒精浸泡小鼠 5min。 将小鼠置于解剖板中，固定四肢，剪开皮肤，充分暴露腹膜。 用眼
5.2 吸取10mL上述混悬液，接种于10mL双料胰蛋白胨大豆肉汤中，置36±1℃培养2h。 5.3 再加入20ml 含20％NaCl的单料胰蛋白胨大豆肉汤，置36±1℃培养24±2h。 5.4 划线转种2个表面干燥的Baird－Parker琼脂平板上，36±1℃培养46±2h。 5.5 挑取可疑菌落移种到肉汤培养基中，置36±1℃温箱培养24h。 5.6 取肉汤培养物0.3ml同0.5ml凝固酶试验冻干
) 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 ①当分别加入0.1ml 10%氯化钠后、混匀静置2h以上观察结果。 ②没有加入蛋白质的管为对照管。 ③小于5nm颗粒的胶体金溶液，每个管内应加入5μl33%的双氧水，否则有不变蓝色及聚沉现象。未加蛋白及加入蛋白量不足以稳定胶体金的试管，即呈现由红变蓝的聚沉现象，而加入蛋白量达到或超过最低稳定量的试管则胶体金的红颜色不变。其中含蛋白量最低的试管即含稳定1ml胶体金的必须蛋白量。在此基础上再加上20%即为稳定所需蛋白质的实际用量。 四、蛋白质的胶体金标记 当蛋白质的最适稳定量及标记的最佳pH
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