- ￥1800
- gelatins/江蓝纯
- JC_CC2670
- 国内
- 2025年07月11日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 库存：
100
- 英文名：
Vero-HCV-NS5A细胞
- 生长状态：
贴壁生长
- 运输方式：
快递运输
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 物种来源：
非洲绿猴
- 组织来源：
肾
- 规格：
1×10⁶cells/T25培养瓶
| 一、基本信息 |
|
| 细胞名称 |
|
| 细胞品牌 |
江蓝纯生物 |
| 细胞规格 |
1×10⁶cells/T25培养瓶 |
| 细胞简介 |
Vero-HCV-NS5A细胞整合有丙型肝炎病毒的NS5A基因，能稳定表达NS5A蛋白，是HCV基础研究的极好摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室郭佳博士于2008年构建并保存 |
| 细胞英文 |
Vero-HCV-NS5A细胞 |
| 种属来源 |
非洲绿猴 |
| 组织来源 |
肾 |
| 疾病特征 |
正常 |
| 支原体检测 |
阴性 |
| 细胞形态 |
上皮细胞样 |
| 生长特性 |
贴壁生长 |
| 传代方法 |
1：2至1：6，每周2次 |
| 生长条件 |
气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37℃ |
| 培 养 基 |
DMEM培养基，90% ；FBS，10% |
| 冻存条件 |
90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存 |
| 发货方式 |
快递运输(特殊情况的另处理) |
| 供应范围 |
仅用于科研使用，不得用于其它用途 |
| 二、接受后处理 |
|
| 处理1 |
收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们 |
| 处理2 |
请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h |
| 处理3 |
弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基 |
| 处理4 |
如果细胞密度达80%-90%请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司的完全培养基 |
| 处理5 |
接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系 |
| 三、细胞操作 |
|
| 复苏细胞 |
将含有1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代
|
如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养: |
| 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 |
|
| 2. 加 1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 |
|
| 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。 |
|
| 4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
|
| 细胞冻存 |
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类: |
| 1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 |
|
| 2. 4 min 1000rpm离心去掉上清。加1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x10⁶/ml，每支冻存管冻存1ml 细胞悬液，注意冻存管做好标识。 |
|
| 3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
|
| 注意事项 |
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。 |
| 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。 |
|
| 3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。 |
|
| 4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细胞汇合度80%左右时正常传代。 |
|
| 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养，培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。 |
|
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验vero（非洲绿猴肾cell):贴壁细胞，以25ml小方瓶为例，培养液用的是MEM。 MEM的配制：10%小牛血清，1%双抗，3%谷氨酰胺，1~1.5%NaHCO3. 传代方法： 1、倒掉培养液，如果细胞脏的话可用PBS洗两次，否则不用。 2.、胰酶0.25%2ml消化1~3分钟，容易消化. 3、倒掉胰酶，加MEM9~12ml,将贴壁细胞摇至悬浮，并用吸管吹匀，一传三或一传四。 4、置37度，5%CO2孵箱。
传代步骤比较传统：倒掉培养液－>PBS洗2遍－>胰酶0.25%消化－>倒掉胰酶－>加培养基－>用吸管吹打均匀－>分瓶－>放置37度，5%CO2孵箱。我的体会是：1、消化时间和实验环境温度也有很大关系，我们实验室条件比较差，不能维持恒温（不过我想大部分实验室目前也还是做不到的）。夏天的时候，消化特别快。但是到了冬天，就很慢，要用手捂老半天。2、消化到什么程度可以，经验很重要，如果每瓶消化都要通过显微镜观察来判断，首先效率太低，而且还很容易消化过头。对光观察培养瓶，当感觉到有些泛白，瓶角有少许细胞
RT-PCR for the Assessment of Genetically Heterogenous Populations of the Hepatitis C Virus
within the ISDR (6 ,7 ). The current view is that although the role of the NS5A protein in HCV disease progression is important, pathologically relevant viral genomic sequence evolution may not be strictly confined to the ISDR alone. Sequence variation
技术资料