HThr(OtBu)-HMPB-ChemMatrix® 树脂

利用植物蛋白质芯片研究蛋白磷酸化

校正。 ( 7 ) TBST 洗涤芯片是为了去除芯片上的尿素，大家知道尿素会减弱芯片检测中激酶的活性。 ( 8 ) 用 X 射线胶片检测放射信号时，将胶片放在用保鲜膜包裹的芯片上，曝光时间根据信号的强弱，可从 30 min 到几天。由于 X 射线胶片变黑仅在一个非常有限的范围内与信号强度成线性或正比关系，因此 X 射线胶片的灵敏度可能会引发一些问题。用磷屏显像仪进行检测时，成像板放置在用保鲜膜包裹的芯片上，然后进行扫描。磷屏显像仪的检测灵敏度比 X 射线胶片的要高 10~100 倍，所以它能够更快地检测

荧光标记mRNA差异显示技术

列为5'ACGACTCACTATAGGGCTTTTTTTTTTTTMN3'，其中 M=A/G/C。N=A /G/C/T],以总RNA为模板进行逆转录反应，每管反应体系如下：总RNA l.0μg，AP 4 pmol ，70℃ 5 min，加入50 mmol/L Tris-HCl（pH8.3），75 mmol/L KCl，3 mmol/L MgCl2，10mmol /L DTT，25μmol/L，dNTPmix（1∶1∶1∶1），SuperScriptⅡ 60 Units，总反应体系20 μl ，42℃ 5 min，50℃ 50 min，70℃ 15 min

【专题讨论】新手做WB的几张片子，请各位高人指点。

：蛋白质样本和生物素标记的蛋白marker标准经SDS-PAGE后转于印迹膜上，然后经一抗→HRP 标记的二抗→HRP催化LumiGLO试剂发生反应并产生荧光→显影于X-光片上。其基本原理如下图： 3.1 主要试剂配制 10×转移缓冲液(transfer buffer)：30.3 gTris-Base，144.1 g Glycine，500 ml三蒸水，振荡混匀后，定容至1000 ml，4℃备用。用时用0.1 M磷酸缓冲液即1×PBS和甲醇稀释至1倍，使甲醇的终浓度