缓冲 HF 改进，表面活性剂，阿拉丁

分离肽和蛋白质色谱柱的维护

色谱一般使用极性有机溶剂如异丙醇含量较高的溶剂冲洗。用几次循环从弱到强的梯度有时比用强洗脱能力流动相等度冲洗效果更好，对疏水性蛋白质吸附的反相色谱柱非常明显。如果上述过程清洗色谱柱的效果不够理想， 可以用非极性有机溶剂或低浓度表面活性剂清洗，二氯甲烷或氯仿对强疏水性或油性化合物的效果较好，表面活性剂如0.5%SDS可以有效清除沉淀的蛋白质，改性剂，如5～8M的脲或盐酸胍可以有限去除强吸附蛋白质。另外，用明显高或低于使用流动相pH值的稀缓冲溶液对部分不溶性沉淀有较好的作用。最有效地清洗方法还取决于色谱

毛细管电泳原理、分离模式、相关技术及发展趋势

，MECC） 采用表面活性剂（如十二烷基硫酸钠，SDS）在运动缓冲液内形成一疏水内核、外部带负电的动态胶束相，利用溶质具有不同的疏水性，因而在水相和胶束相（准面定相）间分配的差异进行分离，既能分离中性溶质又能分离带电组分的CE模式。MECC拓宽了CE的应用范围，主要用于小分子、中性化合物、手性对映体和药物等。常用表面活性剂有各种阴离子表面活性刑、阳离子表面活性剂、非离子和两性表面活性剂。也有用混合胶束，如阴离子表面活性剂和胆酸盐组合混合胶束。有报道采用脂肪醇的微乳液胶束电动色谱（MEEKC

【资源】转帖：蛋白质纯化技术指南

使用超声波震荡器使细胞膜上所受张力不均而使细胞破碎。5.酶法如用溶菌酶破坏微生物细胞等。蛋白质的抽提通常选择适当的缓冲液溶剂把蛋白质提取出来。抽提所用缓冲液的pH、离子强度、组成成分等条件的选择应根据欲制备的蛋白质的性质而定。如膜蛋白的抽提，抽提缓冲液中一般要加入表面活性剂（十二烷基磺酸钠、tritonX-100 等），使膜结构破坏，利于蛋白质与膜分离。在抽提过程中，应注意温度，避免剧烈搅拌等，以防止蛋白质的变性。蛋白质粗制品的获得选用适当的方法将所要的蛋白质与其它杂蛋白分离开来。比较方便的有效