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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 英文名:
5-Isopropyl-2′-deoxyuridine
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- CAS号:
60136-25-6
- 规格:
I349376-2.5mg
英文名:5-Isopropyl-2′-deoxyuridine
纯度或规格:0
SPU:I349376
CAS:60136-25-6
存储温度:室温
运输条件:常规运输
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文献和实验的底物进行筛选。我们通过离体印迹磷酸化作用来确认可能的底物。总的来说,我们的方法能筛选植物蛋白激酶用于进一步的分析,随后的体内实验对评估它们的生理作用是必不可少的 [ 13,24,25 ]。2. 材料 2.1 非变性条件下重组激酶的纯化 ( 1 ) 培养细胞的培养基:含 100 μg/ml 氨苄青霉素,15 μg/ml 卡那霉素,2% 葡萄糖的 2YB 或 LB 培养基。 ( 2 ) 异丙基 β-D-硫代半乳糖苷(IPTG ) 。 ( 3 ) 非变性裂解液:300 mmol
。 ( 21 ) 三氟乙酸:乙醇(95 : 5 ) 溶液。 ( 22 ) 高效液相色谱设备。 ( 23 ) μBonedespliere5C4-300 (19 mm X 150 mm) 柱 。 ( 24 ) 飞行时间质谱设备。 ( 25 ) 圆二色(CD) 谱设备。 ( 26 ) 紫外-可见(UV-VIS ) 光谱仪。 ( 27 ) 核磁共振(NMR) 设备。4. 注 1. Kriippel 型连接子(Thr-Gly-Glu-Lys-Pro,TGEKP) 在许多锌
下,用 1 X PBS、0.5% ( V/V ) Tween-20 溶液封闭 2 h。将适当的单克隆抗体稀释液在室温下孵育芯片 2 h,然后用封闭液冲洗两次,每次 10 min。用相应的 Cy3 标记二抗 ( 与一抗物种特异性主相关)室温下进一步孵育 FAST 片基 1 h。在信号检测之前,片基在室温下用 1 X PBS/0.5% ( V/V ) Tween-20 冲洗两次,每次 30 min,然后用 1X PBS 冲洗两次,每 次 20 min。 如果使用单克隆抗 Phy B 抗体 Pea-25
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