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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-80℃储存
- 英文名:
CU-115
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- CAS号:
2471982-20-2
- 规格:
C655192-1ml
英文名:CU-115
纯度或规格:10mM in DMSO
SPU:C655192
CAS:2471982-20-2
存储温度:-80℃储存
运输条件:特低温运输
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文献和实验1、毕氏酵母氯化锂转化法(1)试剂1M LiCl(用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌;必要时用消毒去离子水稀释)50% PEG3350(Sigma P3640 用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌,用较紧的盖子的瓶子分装)2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存注:醋酸锂对毕氏酵母无效,仅氯化锂有效;PEG3350可屏蔽高浓度LiCl的毒害作用;(2)感受态毕氏酵母的制备接种Pachia pastoris
酵母PEG1000转化法 (1)试剂 缓冲液A:1.0M Sorbitol,10mM Bicine,pH8.35(sigma),3%(v/v)ethylene glycol 缓冲液B:40%(w/v)PEG1000(sigma),0.2M Bicine,pH8.35 缓冲液C:0.15M NaCl,10mM Bicine,pH8.35 未污染的新鲜、试剂级DMSO,-70℃保存 注: 缓冲液A、B、C均用滤膜过滤,-20
min。 lm8. 各加入70 DMSO缓和倒置混匀。42℃热休克15min,迅速插入冰浴。 9. 室温离心13000xg×10sec,尽量弃上清;以0.3ml 1×TE重悬沉淀细胞,涂布SD/-Ura,-His固体培养板,30℃倒置培养3-5天。 SD/-Ura,-His固体培养基,115℃,10lb/in2灭菌15min稍冷却后铺板 A. Difco Nitrogen 1.34g B. 葡萄糖 4.00g C. 10
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