(rel)-PROTAC ERRα Degrader-1，1

大肠杆菌感受态细胞的几种制备方法

过程所用的受体细胞一般是限制－修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株。α-互补现象：因为许多载体都带有一个LacZ基因的调控序列和头146个氨基酸的编码信息，编码α-互补肽，该肽段能与宿主编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补（ α-互补）。当这种载体转入可编码?－半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞中时，在异丙基-?-D硫代半乳糖苷（IPTG）的诱导下，宿主可同时合成这两种肽段，虽然它们各自都没有酶活性，但它们可以融为一体形成具有酶活性的蛋白质。所以称这种现象为α-互补现象。由互补产生

体外DNA重组技术

动物组织中提取基因组DNA 【实验试剂与器材】 1. 消化缓冲液：100mM NaCl，10mM Tris.Cl (pH8.0) 　25mM EDTA (pH8.0)，0.5% (w/v) SDS，0.1mg/ml蛋白酶K。 2. 7.5mol/L乙酸铵。 3. 100%乙醇。 4. 酚/氯仿/异戊醇。 【实验方法与步骤】 1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存； 2. 将200mg～1g的组织用预冷的研钵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每100mg组织

【求助】cAMP的测定

水中 l 0.5M IBMX溶液：11.11mg IBMX溶于100μl DMSO中，-20℃冻存。 l 刺激缓冲液（SB）：14 ml HBSS(1×)+75μlHEPES(1mol/L)+200μlBSA (7.5%)。(注：在测定细胞cAMP时，反应缓冲液中要加入IBMX 0.5mmol/L) l 吗啡贮存液(10mM)：盐酸吗啡37.585mg溶于10ml生理盐水中，0.22μm滤膜过滤除菌，4℃保存备用。