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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Alkyne PEG Biotin, ALK-PEG-Biotin
- 库存:
现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
A163215-500mg/A163215-100mg
| 规格: | A163215-500mg | 产品价格: | ¥2502.9 |
|---|---|---|---|
| 规格: | A163215-100mg | 产品价格: | ¥1132.9 |
Alkyne functionalized polyethylene glycol (Alk-PEG-X) is a bifunctional PEG derivative that can be used to modify proteins, peptides and other materials via Click Chemistry. Alkyne group can react with azide in aqueous solution catalyzed by copper. PEGylation can increase solubility and stability and reduce immunogenicity of peptides and proteins. It can also suppress the non-specific binding of charged molecules to the modified surfaces.
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文献和实验我收集的几个Northern杂交protocol(同位素,DIG,生物素等),供大家参考!
0.25mg/L PEG (3500~8000均可,在缓冲液中加入2%~3% 的PEG可提高平端连接效率)。 无菌蒸馏水(SDW) 试验程序 1. 建立以下反应体系(终体积20μl): 4μl 质粒 ( 50μg/μl) 6μl 目的DNA ( 100μg/μl) 2μl 10X 连接缓冲液 2μl DNA 连接酶 6μl 无菌蒸馏水 2. 反应管置于15℃条件下保温反应24小时,65℃加热10min.终止反应。 3.取5~10μl连接反应物用微型凝胶电泳检测连接效果,其余反应
值被确定以后便可进行标记。具体步骤如下: (1)根据用以标记的胶体金的总量计算出所需要的待标记蛋白质的总量。 (2)在电磁搅拌下,将蛋白质溶液加入胶体金溶液中(pH已调至PI超过0.5pH),加入蛋白质时应逐滴加入,1mg的蛋白质大约5min加完。 (3)在磁性搅拌下加入5%的牛血清白蛋白(BSA)使其终浓度为1%,或加入3%聚乙二醇(PEG MW20000)使其终浓度为0.05%, 我们对比了BSA和PEG稳定胶体金的效果,BSA稳定的标记胶体金,放在4℃达2年半仍然保持良好性能,而用PEG
肽片段。混合的样品用抗生物素蛋白亲和层析法分离。这些肽段还可以进一步通过反向毛细管液相色谱和MALDI-TOF或QTOF2质谱进行分析,质谱后得到的相差8Da 的同位素分子质量峰,这些峰的比率可以作为与原样品各个蛋白相关量的测量尺度, 如一对峰相差8 个质量数,则为同一种蛋白质, 由D0和D8 峰的相对强度进行相对定量。由于ICAT在化学结构上相同且在分子量上只相差8 个中子,所以在用MS 检测时相对量的可信性有所提高。同样的, LC-ESI-MS 也可根据重和轻肽段的相对量提供蛋白的定量信息
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