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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
避光,-20°C储存,充氩;超低温运输
- 英文名:
Pentafluorophenyl PEG, mPEG-PFP
- 库存:
现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
P164174-100mg/P164174-500mg
| 规格: | P164174-100mg | 产品价格: | ¥403.90 |
|---|---|---|---|
| 规格: | P164174-500mg | 产品价格: | ¥1484.90 |
中文名:Pentafluorophenyl PEG, mPEG-PFP
英文名:Pentafluorophenyl PEG, mPEG-PFP
纯度:MW 10000 Da
货号:P164174
存储温度:避光,-20°C储存,充氩
运输条件:超低温运输
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文献和实验洗2次后,沉淀溶于适量TE(pH 8.0)中,用该噬菌体再去感染适量的对数生长期的TG1菌体后,涂2YTAG平板,30℃培养过夜。ELISA方法鉴定重组噬菌体抗体表达,简而言之,在重组噬菌体上清中加入PEG/ NaCl(2.5M NaCl中含20% PEG6000),冰上放置30-60分钟,10000rpm,4℃,离心20分钟,弃上清,立即用适量的2xYT或PBS溶解沉淀,加入事先已加好Raji靶细胞,孵育至少30分钟,用含有0.05% Tween-20的PBS(PBST)洗5次后,如上所述过程
有效; (2) 直接利用第一链反应产物,无须进一步处理和纯化; (3) 不必使用S1 核酸酶来切割双链cDNA 中的单链发夹环。目前合成cDNA 常采用该方法。 四、cDNA 的分子克隆 已经制备好的双链cDNA 和一般DNA 一样,可以插入到质粒或噬菌体中,为此,首先必需连接上接头(Linker),接头可以是限制性内切酶识别位点片段,也可以利用末端转移酶在载体和双链cDNA的末端接上一段寡聚dG 和dC 或dT 和dA 尾巴,退火后形成重组质粒,并转化到宿主菌中进行扩增。合成的cDNA
基团用碱性磷酸酯酶去掉, 最大限度地抑制质粒DNA的自身环化。带5'端磷酸的外源DNA片段可以有效地与去磷酸化的载体相连, 产生一个带有两个缺口的开环分子,在转入E. coli受体菌后的扩增过程中缺口可自动修复。 3、带有平末端 是由产生平末端的限制酶或核酸外切酶消化产生,或由DNA聚合酶补平所致。由于平端的连接效率比粘性末端要低得多,故在其连接反应中,T4 DNA连接酶的浓度和外源DNA及载体DNA浓度均要高得多。通常还需加入低浓度的聚乙二醇(PEG 8000)以促进DNA分子凝聚成聚集体的物质
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