米兰塞替布(ARQ 092)盐酸，1313883-00-9，

常用分子生物学实验方法

)，且两条引物的Tm 相差不超过4℃。引物之间及引物本身避免形 成稳定的二聚体或发夹结构，引物与模板不能有任何错配。 forward primer 5’加:GGCCAATCCGGCC reverse primer 5’加:GGCCTCTAAGGCC 2.2 PCR 2.2.1 PCR 反应体系 模扳(100ng/ul 质粒) 2.00μl 4dNTP(10mM) 1.00μl 10×PCR Buffer 5.00μl MgCl2(25mM) 5.00μl

实用哺乳动物细胞培养手册（下）

质。（1）浸泡：初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡，以使附着物软化或被 溶液掉。新的初次使用的玻璃器皿，在生产及运输过程中，玻璃表面带有大量的干固的灰尘，且玻璃表面常呈碱性及带有一些对细胞有害的物质等。新瓶使用前应先用自来水简单刷洗，然后用稀盐酸液浸泡过夜，以中和其中的碱性物质。再次使用的玻璃器皿则常附有 大量刚使用过的蛋白质，干固后不易洗掉，故用后要立即浸入水中，且要求完全浸入，不 能留有气泡或浮在液面上。（2）刷洗：浸泡后的玻璃器皿一般要用毛刷沾洗涤剂刷洗，以除去器皿表面附着较牢的 杂质

实用哺乳动物细胞培养手册

操作台（至少两级）。操作过程中，应避免引起气溶胶的产生，小心有毒性试剂，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐物品伤人等。 （5）定期检查下列项目：CO2 钢瓶内的CO2 压力；CO2 培养箱内的CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染；无菌操作台内气流压力是否正常，定期更换紫外灯管及HEPA 过滤器滤膜，预滤网﹙300 小时/预滤网，3000 小时/HEPA）。培养细胞生长过程：潜伏期→指数增生期→停滞期 潜伏期(latent phase) 细胞接种后,先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期