Linoleylethanolamide,失活的类似物，68

亲和层析技术研究进展

的，因此在分离过程中可以采取温和的洗脱条件，可以避免蛋白质的变性.。 H.Arostova等用碘化的L—酯氨酸与琼脂糖交联制备亲和层析柱纯化猪胃蛋白酶，效果良好。John等合成的双环八肽类似物，对肠促胰酶肽有很好的特异性吸附。 与金属配基和染料配基相比，多肽具有更高的特异性，且通常是无毒性的。由于与蛋白质结构的相似性.它们之间的相互作用通常是温和的，因此在分离过程中可以采用温和的洗脱条件.避免了蛋白质的变性、失活。然而，自然界中存在的与蛋白质等生物大分子有天然亲和性的多肽种类非常有限。因此，必须找到并得

【资源】蛋白纯化经验指南（）

道谁对！ ^_^ 45) 我是需要在兔肝中纯化一种酶,而且我是刚刚接触蛋白纯化我有几个问题想请教: 1 : 我的目的蛋白在强阴离子柱上结合(buffer : 25 mM 磷酸盐 PH 7.4),但是似乎结合力很弱(因为上样时就有少量蛋白flowthrough,而且洗脱峰在电导值刚开始升高时就开始出现了),我换用了20mM Tris PH 8.2 buffer 之后,蛋白的结合力好像还是很弱,洗脱峰没多大改变.请问我用 PH 8.5 Tris buffer 会改善我的问题么? 2: 由于目的蛋白丰度低易失活

蛋白纯化经验指南

就开始出现了），我换用了20mM Tris PH 8.2 buffer 之后，蛋白的结合力好像还是很弱，洗脱峰没多大改变。请问我用 PH 8.5 Tris buffer 会改善我的问题么? 2： 由于目的蛋白丰度低易失活，而且实验室浓缩的条件有限，我过了脱盐柱和粒子柱后样品蛋白含量低体积大，我想请教：我接下来大体积上疏水柱能行么?会很大的影响我的分辨率么?我的蛋白在疏水柱上结合力很强，总是到梯度最末才洗出来，我该怎样优化一下? 3：我有亲和胶（red A），但是由于经济上的原因不能用特异的含配体