BMH 21,RNA聚合酶I抑制剂，896705-16-1，

应用末端截切、进化、再延长技术提高酶稳定性的方法

酶 A [19 ]、RNA 酶 HI[ 20 ] 、金黄色葡萄球菌核酸酶 R(staphylococcal  nuclease  R)[17] 、硫氛酸酶 [21，22]、Tag DNA 聚合酶的 Stoffel 片段 [23] 以及氯霉素乙酰转移酶 [18] 中得到证实。尽管部分蛋白质不能缺失其末端的甚至一个氨基酸，对于绝大多数蛋白质来说，其末端氨基酸的缺失会显著影响其表达水平、原始构 象和稳定性，然而在一定范围内仍然有功能（如较低的反应温度）。不过，一旦超越这一范围，末端截切便会导致不可

分隔式自我复制：聚合酶和其他酶的定向进化的一个新方法

1. 引言 自我复制，忠实地拷贝自身的基因组，这是所有生命的一个确定的特性。在当今的生命体中，这个最基本的生命活动由不同种类的多核苷酸聚合酶来实现 [1] 。除了基因组的扩增外，多核苷酸聚合酶还有一系列核心的生物功能，包括转录、DNA 修复以及端粒维持。近年来，人们发现某些特殊的聚合酶参与很多不同的生命活动，包括从适应突变、抗体亲和力成熟到抵抗紫外线引起的 DNA 损伤 [2]，而且，还有可能参与 RNA 干扰。异常的聚合酶功能可引起癌症的发生 [4]，许多聚合酶，尤其是病毒的聚合酶

RNA介导的基因沉默

， siRNA 介导的 RNA 沉默的途径有所不同。例如，在植物中，两种不同的短 siRNA  ( 21~22 nt) 和长 siRNA ( 24~26 nt) 均可积累 [16]，而在动物中只有短 siRNA 积累 [4]。siRNA 通过序列互补性与 HNA 诱导的基因沉默复合物 [RISC] 结合，并切割内源 RNA 转录产物而引起基因沉默。siRNA 也负责放大沉默信号，它编码的内源 RNA 能通过植物基因组编码的 RNA 介导的 RNA 多聚酶（RdRP)  [ 17, 18 ] 转化