选择性JAK3抑制剂1，1443235-95-7，≥99%，

金开瑞生物超滤离心管（15 mL）全新上市|蛋白浓缩· 脱盐 · 缓冲液置换，一根搞定

，枪头勿碰膜底，含沉淀先 0.22 μm 过滤，严格配平（差 ≤ 0.1 g）； 3.离心：≤ 4000 × g 离心 15–40 分钟，多数样品 20 分钟即可达标； 4.回收：立即用移液器吸出浓缩液；残留最后 50–100 μL 可加 100–200 μL 缓冲液吹打再吸，回收率提至 95% 以上； 5.换液：浓缩至原体积 1/3–1/2 → 加目标缓冲液混匀 → 再离心，重复 3 次以上置换率 > 99%。 红线：严禁超过最大安全离心力 5000 × g，离心全程必须严格配平，否则裂管、样品全

色谱理论(基本概念和理论)

率，表示相邻两峰的分离程度。R＝。当W1＝W2时，R＝。当R＝1时，称为4σ分离，两峰基本分离，裸露峰面积为95.4%，内侧峰基重叠约2%。R＝1.5时，称为6σ分离，裸露峰面积为99.7%。R≥1.5称为完全分离。《中国药典》规定R应大于1.5。 Ø基本分离方程――分离度与三个色谱基本参数有如下关系： R＝×× 其中称为柱效项，为柱选择性项，为柱容量项。柱效项与色谱过程动力学特性有关，后两项与色谱过程热力学因素有关。 从基本分离方程可看出，提高分离度有三种途径：①增加

原创:下游纯化简易讲义

（在保证达到所需纯度的前提下）。 重组蛋白纯化的基本策略 一、融合表达蛋白的纯化： 融合表达蛋白可以在原目标分子之外带有GST肽段或（His）6肽段，从而使得可以分别用Glutathione Sepharose凝胶或Chelating Sepharose凝胶进行亲和色谱分子，一步可以达到~90%的纯度，经过特异蛋白酶切后，再进行离子交换及高分辨凝胶过滤一般便可以达到所需的纯度（95~99%）。 二、包含体表达蛋白的纯化： 在E.coli系统表达重组蛋白，表达量高时，常形成包含体，包含