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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SSC buffer
- 库存:
现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
S196387-100ml
英文名:SSC buffer
纯度或规格:20× (PH7.0)
SPU:S196387
CAS:-
存储温度:-
运输条件:常规运输
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文献和实验20°C下配制的缓冲液,在较高或较低的温度下PH值会改变吗?
对于普通使用的缓冲液,PH值随温度变化而变化。 下表列出温度改变10℃时,PH值的变化情况: 例如 20℃下配制PH7.4 Tris缓冲液,40℃时PH值为 7.4-(2x0.310)=6.78 缓冲系统 pKa/20℃ [ Delta]pKa/10℃ Mes 6.15 -0.110 Ada 6.60 -0.110 Pipes 6.80 -0.085 Aces 6.90 -0.200 Bes 7.15 -0.160 Mops 7.20 -0.013 Tes
。这里介绍经典的盐桥法(又称为毛细管法)。(一)试剂准备1.变性液:0.5 M NaOH;1.5 M NaCl。2.中和液:1 M Tris-HCl(pH7.4);1.5 M NaCl;3.转移液(20× SSC): NaCl 175.3 g;柠檬酸三钠 82.2 g,NaOH 调 pH 至 7.0,加 ddH2O 至 1000 mL。(二)操作步骤1. 碱变性: 室温下将凝胶浸入数倍体积的变性液中 30 min。2. 中和: 将凝胶转移到中和液 15 min。3. 转移 按凝胶的大小剪裁 NC
%,70%,50%,30%各5min。入PBS(含5mmol/l MgCl 2 ,pH7.3~7.4)10min×2。入0.2n HCl 20min以进一步去除蛋白。 (3)50℃2×SSC,含5mmol/l EDTA溶液中30min。 (4)蛋白酶K(1μg/ml溶于0.1mol/l PBS中,)37℃20~25min。 (5)0.2mol/l 甘氨酸液:室温10min,中止蛋白酶反应。 (6)4%多聚甲醛(PBS新鲜配制):室温20
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