5-氨基-2-溴异烟酸，1242336-80-6，≥97%，

大肠杆菌感受态细胞的几种制备方法

过程所用的受体细胞一般是限制－修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株。α-互补现象：因为许多载体都带有一个LacZ基因的调控序列和头146个氨基酸的编码信息，编码α-互补肽，该肽段能与宿主编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补（ α-互补）。当这种载体转入可编码?－半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞中时，在异丙基-?-D硫代半乳糖苷（IPTG）的诱导下，宿主可同时合成这两种肽段，虽然它们各自都没有酶活性，但它们可以融为一体形成具有酶活性的蛋白质。所以称这种现象为α-互补现象。由互补产生

王镜岩《生物化学》第三版笔记

物都能与CuSO4碱性溶液发生双缩脲反应而生成紫红色或蓝紫色的复合物。利用这个反应可以测定蛋白质的含量。   三、一级结构的测定 （一）一级结构 蛋白质的一级结构是指肽链的氨基酸组成及其排列顺序。氨基酸序列是蛋白质分子结构的基础，它决定蛋白质的高级结构。一级结构可用氨基酸的三字母符号或单字母符号表示，从N-末端向C-末端书写。采用三字母符号时，氨基酸之间用连字符（－）隔开。 （二）测定步骤 测定蛋白质的一级结构，要求样品必须是均一的（纯度大于97％）而且是已知

分子生物学常用实验技术（page 2)

(2) 室温放置10 分钟, 加2.5μl 200mM EDTA 终止反应, 加入2×样品缓冲液,贮存于-20℃。 2. 电泳分析 (1) 用50mM NaCl, 1mM EDTA 制备1.4%的碱性琼脂糖电泳, 并置碱性电泳缓冲液中30 分钟。 (2) 取样品液, 用TE 调整体积, 使第一链和第二链产率测定液的体积相同,加入等体积的2×样品缓冲液(20mmol/L NaOH, 20%甘油，0.025%溴粉兰）。 (3) 加样,电泳到染料距前沿线只剩胶长度的1/3 处，电泳