4-溴均二苯乙烯，4714-24-3，≥98%(GC)，阿拉

分子生物学常用实验技术（page 2)

尼龙膜,上覆二层滤纸,再加盖吸水纸,压上半公斤重物, 以10×SSC 盐溶液吸印,维持18-24 小时。也可用电转移或真空转移。 （5） 取下尼龙膜, 0.4mol/L NaOH 30 秒, 迅速转至0.2mol/L Tris?Cl,pH7.5/2×SSC,溶液中, 5分钟。 （6） 将膜夹于2 层滤纸内, 80℃真空干燥2 小时。 （7） 探针的制备和杂交见第九章分子杂交部分。 [注意] 1、步骤（2）中脱嘌呤时间不能过长。 2、除步骤（1）、（4）、（5）外, 其余均在摇

一些分子生物学常用实验技术方法，建议加分啦

直接转接用于制备感受态细胞的菌液。细胞生长密度以刚进入对数生长期时为好，可通过监测培养液的OD600 来控制。DH5α菌株的OD600 为0.5时,细胞密度在5×107 个/ml左右(不同的菌株情况有所不同),这时比较合适。密度过高或不足均会影响转化效率。　　2. 质粒的质量和浓度: 用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态DNA(cccDNA)。转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA的量过多或体积过大时,转化效率就会降低。1ng的cccDNA即可使50μl 的感受态细胞达到饱和

原位杂交组织化学实验技术

状瘤组织的冰冻切片进行杂交，首次用原位杂交检测了病毒DNA在细胞中的定位，但当时的工作多采用冰冻组织切片或培养细胞，探针均采用同位素标记。 　　由于同位素标记探针具有放射性既污染环境，又对人体有害，且受半衰期限制等缺点，科学工作者们开始探索用非放射性的标记物标记核酸探针进行原位杂交。Bauman（1981）等首先应用荧光素标记cRNA探针做原位杂交，然后用荧光显微镜观察获得成功。Shroyer（1982）报道用2，4二硝基苯甲醛（DNP）标记DNA探针，使该DNA探针具有抗原性，然后用兔抗DNP的抗体