2，2'-(2-羟基丙烷-1，3-二基)双(异吲哚啉-1，3

微型双功能抗体抗CD3/抗Pgp的构建和表达

%的SDS-PAGE分析，在分子量28KD和26KD各有一条蛋白带，经扫描分析28 KD的蛋白占纯化产物的62.97%，26KD的蛋白占纯化产物的33.13%。Western blot结果表明，抗E-tag抗体只能与带有E-tag片段的分子量为28KD的蛋白带杂交，而与分子量为26 KD的蛋白带无特异性反应。3、大小排阻层析抗CD3/抗Pgp Diabody，抗PgpScFv的滞留时间分别为77.29min，90.10 min。抗CD3/抗Pgp Diabody主峰含量≥90%，而分子量为66 KD

时间分辨荧光免疫分析技术

部分与游离部分分开后，利用时间分辨荧光分析仪，即可测定复合物中的稀土离子发射的荧光强度，从而确定待测抗原的量。正常情况下，免疫复合物中的稀土离子自身荧光信号很微弱，若加入一种酸性增强液，稀土离子从免疫复合物中解离出来，和增强液中的β-二酮体、三正辛基氧化膦、Triton X-100等成分形成一种微囊。后者被激发光激发后，则稀土离子可以发出长寿命的极强的荧光信号，使原来微弱的荧光信号增强将近100万倍。采用时间分辨技术测量荧光，采用了门控技术，它是使背景荧光信号降低到零以后，再测定长寿命标记物的荧光。三

实验室常用贮存液的配制参数

1．30%丙烯酰胺溶液 　　【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。 　　【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯