5-(2-羟乙基)-6-甲基-2-硫代-2，3-二氢嘧啶-4

正常人关节软骨细胞的长期培养

6. 培养液Ⅱ：DMEM培养液中补加10%胎牛血清、青霉素1000IU/ml、链霉素1mg/ml、两性霉素2.5μg/ml、谷氨酰胺2mmol/L、1%维生素添加剂（vitamin supplements）以及维生素C 50μg/ml； 7. 10% poly HEMA：称取6g多聚2-羟乙基甲基丙烯酸酯（2-hydroxyethylmethacrylate，poly HEMA），加到50ml 95%乙醇中，于37℃恒温振荡水浴箱中缓慢振荡过夜，次日将所得溶液离心（2500r/min

心脏外科手术的麻醉

以上。 （3）血液稀释：獐也能很好耐受血液稀释，麻醉诱导后，可放出自体血液10ml/kg，待体外循外后输入；放血后须输入等量的胶体溶液（羟乙基淀粉或海脉素或血安定）。青紫型心脏病患儿，放出自体血液20ml/kg，输入等量胶体液，能降低红细胞压积、减低血液粘稠度、改善组织灌注、增加回心血量、增加心输出量、提高组织供氧，有利于纠正代谢性酸中毒。 5、肝素化及其拮抗： （1）肝素化：体外循环前，从中心静脉或右心耳给肝素3mg/kg,10min查act，480s以上方可转机；体外

【经验】PCR实用技巧

；若引物显然是问题的症结所在，重新设计合成新的引物。 被复性结合到模板上的引物不适合延伸。 优化MgCl2、模板DNA和dNTP的浓度；试验此PCR的pH值的范围；考虑用N-三甲基甘氨酸、N,N-二羟乙基甘氨酸或EPP等具有更低温度变异系数的化学物质替代Tris（Cheng et al. 1994）。 应用新鲜制备的热稳定DNA聚合酶。 重新纯化模板DNA以去除抑制物。 在恒定复性温度（55℃）条件下增加PCR循环数。 如果问题依然存在，添加增强剂（如10%二甲基亚砜，5% PEG