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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C储存;超低温运输
- 英文名:
HS-PEG7500-NH2
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
H475452-500mg
中文名:HS-PEG7500-NH2
英文名:HS-PEG7500-NH2
纯度:HCl盐,平均Mₙ7500
货号:H475452
存储温度:-20°C储存
运输条件:超低温运输
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文献和实验吸附在玻璃或塑料器皿管壁上,所有器皿一律需经硅烷化处理。 细胞内总RNA 制备方法很多,如异硫氰酸胍热苯酚法等。许多公司有现成的总RNA 提取试剂盒,可快速有效地提取到高质量的总RNA。分离的总RNA 可利用mRNA 3'末端含有多聚(A)+ 的特点,当RNA 流经oligo (dT)纤维素柱时,在高盐缓冲液作用下,mRNA 被特异的吸附在oligo(dT)纤维素上,然后逐渐降低盐浓度洗脱,在低盐溶液或蒸馏水中,mRNA 被洗下。经过两次oligo(dT)纤维素柱,可得到较纯的mRNA。纯化
糖凝胶电泳(可18V过夜)后EB染色观察。 (2) 将凝胶块浸没于0.25mol/L HCl中脱嘌呤, 10分钟。 (3) 取出胶块, 蒸馏水漂洗, 转至变性液变性45分钟。经蒸馏水漂洗后转至中和液中和30分钟。 (4) 预先将尼龙膜,滤纸浸入水中,再浸入10×SSC中,将一玻璃板架于盆中铺一层滤纸(桥)然后将胶块反转放置,盖上尼龙膜,上覆二层滤纸,再加盖吸水纸,压上半公斤重物, 以10×SSC盐溶液吸印,维持18-24小时。也可用电转移或真空转移。 (5) 取下尼龙膜, 0.4mol/L
置于卫生纸上使液体流尽,真空干燥10分钟或室温干燥。 10、将沉淀溶于20μl TE缓冲液(pH8.0,含20μg /ml RNaseA)中,储于-20℃冰箱中。 [注意] 1. 提取过程应尽量保持低温。 2. 提取质粒DNA过程中除去蛋白很重要,采用酚/氯仿去除蛋白效果较单独用酚或氯仿好,要将蛋白尽量除干净需多次抽提。 3. 沉淀DNA通常使用冰乙醇,在低温条件下放置时间稍长可使DNA沉淀完全。沉淀DNA也可用异丙醇(一般使用等体积),且沉淀完全,速度快,但常把盐沉淀下来
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