马来酰亚胺-PEG5K-马来酰亚胺，阿拉丁

【交流】生物素-亲和素系统

糖蛋白，分子量为68kD，等电点pＩ=１０.５；耐热井耐受多种蛋白水解酶的作用．尤其是与生物素结合后，稳定性更好。每个亲和素能结合4个分子的生物素，二者之间的亲和力极强，亲和素常数（K）为１０１５Ｌ／mol，比抗原与抗体间的亲和力（K＝10５～１１L／mol）至少高1万倍，因此二者的结合特异性高和稳定性好。亲和索以结合１μg生物素所需的量作为其活性单位，1mg纯的亲和素的活性约为13—15U。 因此，BAS即可用于微量抗原、抗体及受体的定量、定性检测及定位观察研究，亦可制成亲和介质用于上述各类反应

荧光标记基团的选择及其在荧光定量PCR中的应用

过的分子是抗体，经常使用标记过的抗体来检测特定的目标分子。可在多种检测系统中使用荧光标记来实现灵敏和定量的检测。经常使用具有化学反应活性的荧光基团衍生物来实现荧光标记。通常的反应活性基团包括与氨基反应的异硫氰酸酯衍生物，如FITC和TRITC(荧光素和罗丹明的衍生物);和氨基反应的琥珀酰亚胺酯，如NHS-荧光素或NHS-罗丹明;以及和巯基反应的马来酰亚胺活化的荧光素，如荧光素-5-马来酰亚胺。这些具有反应活性的染料与其他分子进行反应会在荧光基团和标记的分子之间形成稳定的共价键。长久以来一直将异硫氰酸

免疫PCR技术进展

的操作时间。这种免疫-PCR系统的关键改进就是用异双功能化学关联剂制备标记DNA-抗体偶联物。制备过程如下。（1）氨基修饰寡核苷酸与SATA反应，形成乙酰硫代乙酰修饰DNA。（2）Sulfo-SMCC与抗体反应，形成马来酰亚胺修饰抗体。（3）混合马来酰亚胺修饰抗体和乙酰硫代乙酰修饰DNA，并加入羟胺盐酸，在黑暗条件下反应，使抗体和标记DNA偶联。（4）反应混合物用HPLC凝胶过滤纯化偶联物，收集的偶联物在4℃下保存。在这偶联物中，ssDNA是连在抗体的Fc段上，因此并不影响抗体的活性