贻贝足蛋白1，10mg/mL(在1%柠檬酸中)，阿拉丁

DNA重组实验中常用的技术

Tris-HCl(pH7.5)、5mmol/L MgCl 2 、1%Triton –X 100]，轻轻上下振荡至透明，红 细胞 完全溶解。 （3）冰浴10min，离心，3000rpm，10min。弃上清，STMT重复处理1～3次。 （4）弃上清，白色沉淀物加10ml STE[0.1mol/L NaCl、10mmol/l Tris-HCl(pH8.0)、1mmol/L EDTA(pH8.0)]，先少量，充分混匀，然后加10mg/ml蛋白酶K100μl，20%SDS30μl

免疫组化染色方法及常用抗原修复方法

满足以上步骤中对温度和时间的要求）。取出容器，室温冷却 10~20 分钟（注意：不可将切片从缓冲液中取出冷却，以便使蛋白能够恢复原有的空间构型）。 PBS 洗，下接免疫组化染色步骤。适用的抗原有：AR，Bax，Bcl-2，C-fos，X-jun，C-kit，C-myc，E-cadherin，Chromogranin A，Cyclin，ER，Heat shock protein，HPV，Ki-67，MDMZ，p53，p34，p16，p15，P-glycoprotein，PKC，PR，PCNA，ras

硝酸纤维膜固相杂交

细胞中提取是进行基因诊断的先决条件。制备的原则是既要将蛋白质、脂类、糖类等物质分离干净，又要保持分子的完整。蛋白酶K的应用使这两个原则得到了保证。在提取的反应体系中，SDS是离子型表面活性剂，主要作用是：（1）溶解膜蛋白而不破坏细胞 膜；（2）解聚细胞 中的核蛋白；（3）与蛋白质结合，使蛋白质变性而沉淀下来。蛋白酶K可将蛋白降解成小的多肽和氨基酸，使分子尽量完整地分离出来。具体方法如下： （一）白细胞的制备 （1）采集外周静脉血10ml，加1.7ml ACD（柠檬酸0.48g、柠檬酸钠1.32g