- ￥1290 - 3960
- 帛科
- BK-DB4390
- 国产
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
57
- 英文名：
Recombinant Human ENO1 protein
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
-20 to -80 °C
- 规格：
50μg、100ug 、1mg
| 货号 | BK-DB4390 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
| 纯度 | >90% as determined by SDS-PAGE | 预测分子量 | 11.28 kDa |
| 表达宿主 | E.coli | 种属 | Homo sapiens (Human) |
蛋白构建: A DNA sequence encoding the human ENO1 (Pro267-Leu354) was fused with His tag
制剂: Supplied as solution form in PBS pH 7.5 or lyophilized from PBS pH 7.5.
运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
分子别名: ENO1L1 Protein, Human; HEL-S-17 Protein, Human; MPB1 Protein, Human; NNE Protein, Human; PPH Protein, Human
背景介绍: The ENO1 gene encodes a multifunctional enzyme that has been identified as a key component of the glycolytic pathway. ENO1 overexpression and post-translational modifications could be of diagnostic and prognostic value in many cancer types. The results of the ENO1 expression profiling of ovarian follicles suggest that ENO1 may play an important dual role in the progress of follicular development, where ENO1 acts as a glycolytic enzyme and also mediates apoptosis. ENO1 overexpression could make the primary culture follicle granulosa cells in vitro improve progesterone secretion. The over-expression of ENO1 protein can enhance the abilities of proliferation and migration in gastric cancer cells of AGS, which indicates that ENO1 may be an important potential tumor-marker associated with the development of gastric cancer. ENO1 and GPI can be used as markers of human sperm freezability before starting the cryopreservation procedure. The inhibition of ENO1 expression may be a novel strategy for therapy for NHLs patients, and it may be a target for drug resistance.
表达载体在基因工程有以下几种元件：
（1）选择标志的编码序列；
（2）可控转录的启动子；
（3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)；
（4）一个多限制酶切位点接头；
（5）宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达：
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 聚凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
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| Recombnant Human ARC | Chicken IgM / APC |
| Cy3标记马IgG | Mouse IgG / AF680 |
| Cy3标记牛IgM | Mouse IgG2a / FITC Isotype Control |
| APC标记狗IgG | Bovine IgG / FITC |
| 鸡IgM（亲和纯化) | Rat IgM / RBITC |
| 天然人IgA蛋白/人免疫球蛋白A | Rat IgG / AF750 |
| Cy7标记大鼠IgG（同型对照) | Dog IgM / APC |
| Alexa Fluor 350标记羊IgG（同型对照) | 心脏钙粘蛋白封闭多肽 |
| Alexa Fluor 680标记小鼠IgG（同型对照) | Goat IgG / AF350 |
| FITC标记小鼠IgG2a（同型对照） | Rat IgG / Cy7 |
| 罗丹明标记大鼠IgM（同型对照) | Human IgA Native protein |
| FITC标记牛IgG | Chicken IgM |
| Alexa Fluor 750标记大鼠IgG（同型对照) | Recombinant Human ENO1 proteinDog IgG / APC |
| APC标记狗IgM | Bovine IgM / Cy3 |
| APC标记鸡IgM | Horse IgG / Cy3 |
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质的分离纯化：
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
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