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M5076 小鼠网织细胞肉瘤

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  • gelatins/江蓝纯
  • JC_CC2407
  • 国内
  • 2025年07月08日
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    • 详细信息
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    • 供应商

      上海机纯实业有限公司

    • 库存

      100

    • 英文名

      M5

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 运输方式

      快递运输

    • 细胞形态

      梭形

    • 物种来源

      小鼠

    • 组织来源

      网织细胞

    • 规格

      1×10⁶cells/T25培养瓶

    一、基本信息

    细胞名称

    M5076 小鼠网织细胞肉瘤

    细胞品牌

    江蓝纯生物

    细胞规格

    1×10⁶cells/T25培养瓶

    细胞简介

    该细胞来源于C57BL/6小鼠卵巢组织自发的网织细胞肉瘤,经细胞形态和功能鉴定后为巨噬细胞来源:该细胞具有吞噬活性;表达Fc受体,与绵羊红细胞形成玫瑰花环;对51Cr标记的红细胞具有抗体依赖的细胞毒反应;对同源小鼠肿瘤细胞(B16-F1)有巨噬细胞样的细胞毒作用,且不需要LPS的激活;没有NK细胞的活性;具有同小鼠腹腔巨噬细胞相当的溶菌酶、非特异性酯酶和磷酸酶的活性;超微结构显示该细胞内有吞噬小泡,缺乏紧密连接,这些特点都符合巨噬细胞的形态特征。核型分析显示该细胞为亚二倍体,因罗伯逊易位,>80%的染色体

    细胞英文

    M5

    种属来源

    小鼠

    组织来源

    网织细胞

    疾病特征

    肉瘤

    支原体检测

    阴性

    细胞形态

    梭形

    生长特性

    半悬浮生长,贴壁细胞呈短梭形

    传代方法

    1:2至1:6,每周2次

    生长条件

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37℃

    培 养 基

    RPMI 1640,90% ;FBS,10%

    冻存条件

    90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存

    发货方式

    快递运输(特殊情况的另处理)

    供应范围

    仅用于科研使用,不得用于其它用途

    二、接受后处理

    处理1

    收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们

    处理2

    请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h

    处理3

    弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的完全培养基

    处理4

    如果细胞密度达80%-90%请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司的完全培养基

    处理5

    接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系

    三、细胞操作

    复苏细胞

    将含有1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

    细胞传代

     

    如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养:

    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    2. 加 1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

    3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

    4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

    细胞冻存

    待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类:

    1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

    2. 4 min 1000rpm离心去掉上清。加1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10⁶/ml,每支冻存管冻存1ml 细胞悬液,注意冻存管做好标识。

    3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

    注意事项

    1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

    2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。

    3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。

    4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细胞汇合度80%左右时正常传代。

    5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养,培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。

     

    产品细节图片1

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