- ￥1290 - 3960
- 帛科
- BK-DB3152
- 国产
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
27
- 英文名：
Recombinant Human MCP3 protein
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海帛科
- 保存条件：
-20 to -80 °C
- 规格：
50μg、100ug 、1mg
重组蛋白质的可溶性鉴定：
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
商品介绍：
内毒素: Please contact with the lab for this information.
蛋白构建: A DNA sequence encoding the human MCP3 (Gln24-Leu99) was fused with His tag
制剂: Supplied as solution form in PBS pH 7.5 or lyophilized from PBS pH 7.5.
运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
分子别名: C-C motif chemokine 7,Monocyte chemoattractant protein 3,Monocyte chemotactic protein 3,MCP-3,NC28,Small-inducible cytokine A7.
背景介绍: Chemokines are a family of small chemotactic cytokines, or proteins secreted by cells. Chemokines share the same structure similarities such as small size, and the presence of four cysteine residues in conserved locations in order to form their 3-dimensional shape. Some of the chemokines are considered pro-inflammatory which can be induced to recruit cells of the immune system to a site of infection during an immune response, while others are considered homeostatic and are implied in controlling the migration of cells during normal processes of tissue maintenance and development. There are four members of the chemokine family: C-C kemokines, C kemokines, CXC kemokines and CX3C kemokines. The C-C kemokines have two cysteines nearby the amino terminus. There have been at least 27 distinct members of this subgroup reported for mammals, called C-C chemokine ligands-1 to 28. Chemokine ligand 7(CCL7), also known as MCP-3, is a isform of the C-C chemokine subfamily of the chemokine family which is produced by certain tumor cells and by macrophages. It also own two adjacent N-terminal cysteine residues. Chemokine ligand 7(CCL7) spacifically attracts monocytes, and regulates macrophage function.
重组蛋白质的分离纯化：
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
表达载体在基因工程有以下几种元件：
（1）选择标志的编码序列；
（2）可控转录的启动子；
（3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)；
（4）一个多限制酶切位点接头；
（5）宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达：
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 聚凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
公司出售的相关产品：
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
商品介绍：
| 货号 | BK-DB3152 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
| 纯度 | >90% as determined by SDS-PAGE | 预测分子量 | 10.58 kDa |
| 表达宿主 | E.coli | 种属 | Homo sapiens (Human) |
蛋白构建: A DNA sequence encoding the human MCP3 (Gln24-Leu99) was fused with His tag
制剂: Supplied as solution form in PBS pH 7.5 or lyophilized from PBS pH 7.5.
运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
分子别名: C-C motif chemokine 7,Monocyte chemoattractant protein 3,Monocyte chemotactic protein 3,MCP-3,NC28,Small-inducible cytokine A7.
背景介绍: Chemokines are a family of small chemotactic cytokines, or proteins secreted by cells. Chemokines share the same structure similarities such as small size, and the presence of four cysteine residues in conserved locations in order to form their 3-dimensional shape. Some of the chemokines are considered pro-inflammatory which can be induced to recruit cells of the immune system to a site of infection during an immune response, while others are considered homeostatic and are implied in controlling the migration of cells during normal processes of tissue maintenance and development. There are four members of the chemokine family: C-C kemokines, C kemokines, CXC kemokines and CX3C kemokines. The C-C kemokines have two cysteines nearby the amino terminus. There have been at least 27 distinct members of this subgroup reported for mammals, called C-C chemokine ligands-1 to 28. Chemokine ligand 7(CCL7), also known as MCP-3, is a isform of the C-C chemokine subfamily of the chemokine family which is produced by certain tumor cells and by macrophages. It also own two adjacent N-terminal cysteine residues. Chemokine ligand 7(CCL7) spacifically attracts monocytes, and regulates macrophage function.
重组蛋白质的分离纯化：
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
表达载体在基因工程有以下几种元件：
（1）选择标志的编码序列；
（2）可控转录的启动子；
（3）转录调控序列(转录终止子，核糖体结合位点)；
（4）一个多限制酶切位点接头；
（5）宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达：
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 聚凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
公司出售的相关产品：
| Recombnant Human MYO1G, N-H | large S protein/S protein Antibody Blocking Peptide |
| D型-过氧化酶活化增生受体封闭多肽 | NOVA2 Antibody Blocking Peptide |
| 葡萄糖转运蛋白4增强因子封闭多肽 | ABI3 Antibody Blocking Peptide |
| 白细胞介素5封闭多肽 | THRSP Antibody Blocking Peptide |
| AKIRIN2蛋白封闭多肽 | Phospho-PTPN11 (Tyr546) Antibody Blocking Peptide |
| 富亮氨酸重复激酶2封闭多肽 | SLC5A6 Antibody Blocking Peptide |
| 锌指蛋白521封闭多肽 | FGF22 Antibody Blocking Peptide |
| 表皮生长因子受体III型突变体封闭多肽 | DNA损伤自噬调整蛋白封闭多肽 |
| 神经肿瘤Nova2抗原封闭多肽 | EGFR vIII Antibody Blocking Peptide |
| ABI基因家族2封闭多肽 | EHZF/ZN521 Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2封闭多肽 | LRRK2 Antibody Blocking Peptide |
| 甲状腺激素反应蛋白封闭多肽 | AKIRIN2 Antibody Blocking Peptide |
| 碳酸氢钠协同转运蛋白5-A6封闭多肽 | Recombinant Human MCP3 proteinIL5 Antibody Blocking Peptide |
| 成纤维细胞生长因子22封闭多肽 | SLC2A4RG Antibody Blocking Peptide |
| 肝炎病毒S蛋白封闭多肽 | AR-delta Antibody Blocking Peptide |
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