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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
26
- 英文名:
Recombinant Human HDAC5 protein
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海帛科
- 保存条件:
-20 to -80 °C
- 规格:
50μg、100ug 、1mg
商品介绍:
内毒素: Please contact with the lab for this information.
蛋白构建: A DNA sequence encoding the human HDAC5 (681-1087) was fused with His tag
制剂: Supplied as solution form in PBS pH 7.5 or lyophilized from PBS pH 7.5.
运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
分子别名: Antigen NY-CO-9
背景介绍: Responsible for the deacetylation of lysine residues on the N-terminal part of the core histones (H2A, H2B, H3 and H4). Histone deacetylation gives a tag for epigenetic repression and plays an important role in transcriptional regulation, cell cycle progression and developmental events. Histone deacetylases act via the formation of large multiprotein complexes. Involved in muscle maturation by repressing transcription of myocyte enhancer MEF2C. During muscle differentiation, it shuttles into the cytoplasm, allowing the expression of myocyte enhancer factors. Involved in the MTA1-mediated epigenetic regulation of ESR1 expression in breast cancer. Serves as a corepressor of RARA and causes its deacetylation. In association with RARA, plays a role in the repression of microRNA-10a and thereby in the inflammatory response.
重组蛋白质的可溶性鉴定:
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中,然后在-80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次, 每次 10 sec,间歇 10 sec,电压 200-300 V。
4. 10000g,4oC,离心 20min,取上清(为溶液 A), - 20 oC 保存; 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解(为溶液 B),同样 -20 oC 保存,供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳, 考马斯亮蓝染色, 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中, 则为可溶性蛋白;如果是在 B 溶液中,则为非可溶蛋白。
重组蛋白质的分离纯化:
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2(Lysis buffer under denaturing conditions )中,室温下搅拌和吹打沉淀,避免泡沫生成。
2. 10000g ,4 oC,离心 30 min,收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子,并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统,用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose,调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中, 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ~ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2(Washbuffer 1 and 2)清洗柱 子,直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液(Elution buffer)洗脱重组蛋白质, 在 A280 值监测下,收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
表达载体在基因工程有以下几种元件:
(1)选择标志的编码序列;
(2)可控转录的启动子;
(3)转录调控序列(转录终止子,核糖体结合位点);
(4)一个多限制酶切位点接头;
(5)宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达:
1. 挑取转化有质粒的单菌落, 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中, 37 oC,250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml(1:20)选择性 LB 液体培养基 中, 37 oC,250 rpm/min 振摇培养至光密度(OD600=0.6)时,取 1 ml 样本作 为诱导前标本, 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀,-20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中,使 IPTG 终浓度为 1 mM ,37 oC ,250 rpm/min 振摇培养 4 ~ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本,同上法收集菌体沉淀, -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS(pH= 8.0)重悬, 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液, 煮沸加热 5min,SDS 聚凝胶(SDS-PAGE)电泳分离 , 考马斯亮蓝染色 3 小时后,脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆,扩大诱导规模,收集菌体沉淀,于- 20 oC 保存,准备做下一步分析及纯化。
公司出售的相关产品:
| 货号 | BK-DB3070 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
| 纯度 | >90% as determined by SDS-PAGE | 预测分子量 | 43.9 kDa |
| 表达宿主 | E.coli | 种属 | Homo sapiens (Human) |
蛋白构建: A DNA sequence encoding the human HDAC5 (681-1087) was fused with His tag
制剂: Supplied as solution form in PBS pH 7.5 or lyophilized from PBS pH 7.5.
运输方式: In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存: Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.Store at 2 to 8 °C for one week .Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶: Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
分子别名: Antigen NY-CO-9
背景介绍: Responsible for the deacetylation of lysine residues on the N-terminal part of the core histones (H2A, H2B, H3 and H4). Histone deacetylation gives a tag for epigenetic repression and plays an important role in transcriptional regulation, cell cycle progression and developmental events. Histone deacetylases act via the formation of large multiprotein complexes. Involved in muscle maturation by repressing transcription of myocyte enhancer MEF2C. During muscle differentiation, it shuttles into the cytoplasm, allowing the expression of myocyte enhancer factors. Involved in the MTA1-mediated epigenetic regulation of ESR1 expression in breast cancer. Serves as a corepressor of RARA and causes its deacetylation. In association with RARA, plays a role in the repression of microRNA-10a and thereby in the inflammatory response.
重组蛋白质的可溶性鉴定:
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中,然后在-80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次, 每次 10 sec,间歇 10 sec,电压 200-300 V。
4. 10000g,4oC,离心 20min,取上清(为溶液 A), - 20 oC 保存; 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解(为溶液 B),同样 -20 oC 保存,供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳, 考马斯亮蓝染色, 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中, 则为可溶性蛋白;如果是在 B 溶液中,则为非可溶蛋白。
重组蛋白质的分离纯化:
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2(Lysis buffer under denaturing conditions )中,室温下搅拌和吹打沉淀,避免泡沫生成。
2. 10000g ,4 oC,离心 30 min,收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子,并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统,用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose,调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中, 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ~ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2(Washbuffer 1 and 2)清洗柱 子,直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液(Elution buffer)洗脱重组蛋白质, 在 A280 值监测下,收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
表达载体在基因工程有以下几种元件:
(1)选择标志的编码序列;
(2)可控转录的启动子;
(3)转录调控序列(转录终止子,核糖体结合位点);
(4)一个多限制酶切位点接头;
(5)宿主体内自主复制的序列。
重组蛋白质的诱导表达:
1. 挑取转化有质粒的单菌落, 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中, 37 oC,250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml(1:20)选择性 LB 液体培养基 中, 37 oC,250 rpm/min 振摇培养至光密度(OD600=0.6)时,取 1 ml 样本作 为诱导前标本, 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀,-20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中,使 IPTG 终浓度为 1 mM ,37 oC ,250 rpm/min 振摇培养 4 ~ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本,同上法收集菌体沉淀, -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS(pH= 8.0)重悬, 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液, 煮沸加热 5min,SDS 聚凝胶(SDS-PAGE)电泳分离 , 考马斯亮蓝染色 3 小时后,脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆,扩大诱导规模,收集菌体沉淀,于- 20 oC 保存,准备做下一步分析及纯化。
公司出售的相关产品:
| Recombnant Human VTN, N-H | PDS5B Antibody Blocking Peptide |
| 泛素蛋白连接酶封闭多肽 | MFAP4 Antibody Blocking Peptide |
| 蛋白质二硫键异构酶封闭多肽 | S100A2 Antibody Blocking Peptide |
| 羟基类固醇(17β)脱氢酶4/17β-HSD4封闭多肽 | TIRAP Antibody Blocking Peptide |
| 重组人LIGHT (Trimer)蛋白 | BACE2 Antibody Blocking Peptide |
| 蛋白磷酸酶1调节亚基3C封闭多肽 | ESRRB Antibody Blocking Peptide |
| γ氨基丁酸转氨酶封闭多肽 | CD105 Antibody Blocking Peptide |
| DPAGT1蛋白封闭多肽 | 锌指蛋白385B封闭多肽 |
| 微丝相关蛋白4封闭多肽 | DPAGT1 Antibody Blocking Peptide |
| S100A2封闭多肽 | ABAT Antibody Blocking Peptide |
| β淀粉样前体蛋白裂解酶2封闭多肽 | P1R3C Antibody Blocking Peptide |
| 白细胞介素1受体衔接蛋白封闭多肽 | Recombinant human LIGHT (Trimer) protein, N-His-Flag (HEK293) |
| 雌激素相关受体β封闭多肽 | Recombinant Human HDAC5 proteinHSD17B4 Antibody Blocking Peptide |
| 内皮糖蛋白封闭多肽 | PDIA2 Antibody Blocking Peptide |
| 雄激素诱导增殖抑制蛋白封闭多肽 | FBXO32 Antibody Blocking Peptide |
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¥1290 - 3960









