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- 2025年11月06日
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- 供应商：
普洛麦格
- 英文名：
ADP-Glo™ Max Assay
- 规格：
10,000 assays
说明：
ADP-GloTM Max Assay (ADP-GloTM Max 检测试剂盒 ) 是一个基于发光法的 ADP 检测试剂盒，通过定量反应中产生的 ADP，为检测 ATP 酶或激酶活性提供一种通用、均质、高通量的筛选方法。这个试剂盒可被用于检测几乎所有可生成 ADP 的酶的活性 ( 如激酶或ATP 酶 )，即使在较高浓度 ( 高达 5mM) 的 ATP 存在时。 ADP-GloTMMax Assay 产生与酶活性正相关的强信号，适用于各种多孔板模式。该试剂盒的操作分两步进行： 1) 在 ADP 生成反应完成后，加入等体积的 ADP-GloTM 试剂终止反应，并消耗尽剩余的 ATP； 2) 加入ADP-GloTM Max 检测试剂 , 将 ADP 转变为 ATP 的同时，在偶联的萤光素酶 / 萤光素反应中将 ATP 转变为光信号。ADP-GloTM Max Assay 具有宽广的动态范围，即使在 ATP 到ADP 的转化率很低时，也能产生强信号，使其非常适合筛选低活性的 ATP 酶，如药物的膜转运子、热休克蛋白等。该试剂盒产生的假阳性率极低， Z' 值大于 0.7。
请浏览 www.promega.com.cn查看我们提供的多种激酶酶系统。
特点：
• 在 ATP 转化率低时，信号强度仍然很高： 用户可以检测到更加接近于真实生理条件下的酶活性，使得这种检测法非常适合低活性的 ATP 酶 / 激酶。
• 灵敏： 对低浓度的 ADP 敏感，因此比其他试剂盒需要的酶更少，节约成本。
• 通用： 几乎可用于任何可生成 ADP 的酶，使得研究人员可用单个平台筛选更加广泛的酶类。
• 适用于范围广泛的 ATP 水平： 在 ATP 浓度高达 5mM 时仍适用，对于对 ATP具有高 Km 值的酶类以及酶的作用模式研究非常重要。
• 准确： 在宽广的 ATP 起始浓度范围内，准确地检测 ADP 水平。使用者确信检测到的活性能真实地反映酶活性，产生的 IC50 的准确性可与基于放射性的检测法媲美。
储存条件： 将整个系统储存于 -20℃。使用前，将所有组分在室温完全融化，接着充分混匀后备用。由于冻融循环后 ATP 易于水解，因此应将其分装成单次使用的小份，储存于 -20℃。将 ADP-GloTM Max检测试剂 (ADP-GloTM Max 检测缓冲液 + 底物 ) 制备好后，分装成小份，储存于 -20℃。融化后，ADP-GloTM Max检测缓冲液可能形成沉淀，请查看技术手册的 3.A 部分，了解溶解沉淀的操作方法。为方便起见，可将 ADP-GloTM 试剂和 ADP-GloTM Max 检测试剂置于室温 (22℃ )24个小时，也不会损失信号。
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文献和实验Steady State ATPase Assays Coupled Enzyme System
. 5. Make Tris-MgCl2 -DTT mix for all assays. Tris-MgCl2 -DTT mix = (n = # of assays + 1) n x 20 µL 0.5 M Tris-OAc, pH 7.5 20 µL 10 mM MgCl2 20 µL 10 mM DTT 70 µL DDW
. The cultures are then pelleted at ~2,000 RPM for 4 minutes and the pellet re-suspended in 500µl of cold lysis buffer on ice for 10 minutes and then centrifuged 5,000 RPM for 5 minutes at 4°C. The pellet is considered the nuclear fraction while the solution
in a siliconized ultracentrifuge microfuge tube, then add motor and GTP-depleted microtubules using a set concentration of microtubules (e.g., 2 µM) and a range of motor concentrations (e.g., 0.5 - 10 µM). Click here for an example of a set of assays
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