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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
51
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
Mouse
- 抗体英文名:
Mouse Anti-Rabbit IgM/Bio
- 抗体名:
生物素标记的小鼠抗兔IgM
- 免疫原:
Native Rabbit IgM
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
WB=1:1000-10000, IHC-P=1:100-500, IHC-F=1:100-1000, IF=1:100-1000, ELISA=1:1000-10000 not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
- 保存条件:
Store at -20℃
- 浓度:
2.0 mg/ml
- 规格:
100ul
英文名称:Mouse Anti-Rabbit IgM/Bio
中文名称:生物素标记的小鼠抗兔IgM
别名:Mouse Anti-Rabbit IgM (Biotin); Immunoglobulin M;
抗体来源:Mouse
克隆类型:Polyclonal
交叉反应: Guinea Pig
产品应用:WB=1:1000-10000, IHC-P=1:100-500, IHC-F=1:100-1000, IF=1:100-1000, ELISA=1:1000-10000
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
性状:Liquid
浓度:2.0 mg/ml
免疫原:Native Rabbit IgM
亚型:IgG
纯化方法:affinity purified by Protein G
缓冲液:10 mM TBS (pH=7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% glycerol.
保存条件:Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
| Immunoglobulin M (IgM) normally constitutes about 10% of serum immunoglobulins. IgM antibody is prominent in early immune responses to most antigens and is largely confined to plasma due to it's large size. Monomeric IgM is expressed as a membrane bound antibody on the surface of B cells and as a pentamer when secreted by plasma cells. Due to it's high valency IgM is more efficient than other isotypes is binding antigens with repeating epitopes (virus particles and red blood cells) and is more efficient than IgG in activiating the complement pathway. The gene for the mu constant region contains four domains separated by short intervening sequences. |
第一抗体
第一抗体就是能和非抗体性抗原(特异性抗原)特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。
第二抗体
第二抗体是能和抗体结合,即抗体的抗体,其主要作用是检测抗体的存在,放大一抗的信号。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,去免疫异种动物,由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体,兔抗AIV IgG为第二抗体。第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)。
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
注意事项:
1、一抗种属不同,最好都是单抗,二抗匹配对应的一抗,二抗不同荧光标记。如果可以,二抗最好来自同一宿主物种。
2、一抗是单克隆抗体时:二抗应针对一抗的类或亚类。例如,mouse IgM一抗需要抗mouse IgM二抗。当使用多个亚类特异性一抗时,应使用亚类特异性二抗来区分一抗。例如,使用IgG2和IgG1一抗的免疫荧光双标实验使用抗IgG2和抗IgG1二抗更优。
3、一抗是多克隆抗体时:可以使用IgG二抗,因为大多数多克隆抗体是IgG类免疫球蛋白。
4、为了限制二抗与近缘种的一抗非特异性结合,使用对近缘种预吸附的二抗。例如,抗mouse二抗可能与rat一抗发生交叉反应。使用rat血清吸附的抗mouse二抗可减少交叉反应性。注:谨慎选择对近亲属物种(如rat和mouse)预先吸附的二抗,吸附可消除高亲和力抗体,导致信号减弱。
5、封闭液的选择:封闭液作用就是尽量封闭掉能与二抗结合产生非特异性染色的抗原。所以,封闭液尽量选择与二抗种属同源的血清封闭液。比如,二抗是“donkey抗goat AF488、donkey抗rabbit AF594”,那么最佳封闭液就是donkey血清封闭液。免疫荧光双标实验中二抗种属来源于非mouse、非rabbit、非goat,而是选择donkey、马、鸡等种属来源,并且二抗采用一样的种属来源,这样可以一种来源的血清完成两个抗体的封闭。
6、两种一抗同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要自我摸索,一抗4℃孵育过夜比较好。
7、荧光染色后一般在1h内完成观察,或于4℃保存4h,时间过长,可能会使荧光提前衰退。
下列是公司正在出售的产品:
| CD2抗体 | SLC25A51 Antibody Blocking Peptide |
| 谷氨酰胺转胺酶3抗体 | CACNG6 Antibody Blocking Peptide |
| Pellino 2蛋白抗体 | FGD4 Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化表皮生长因子受体抗体 | TSHZ2Antibody Blocking Peptide |
| DNAJB5蛋白抗体 | phospho-P53 (Ser33) Antibody Blocking Peptide |
| Prader-Willi综合征相关蛋白抗体 | RNASE3 Antibody Blocking Peptide |
| 硫酸软骨素酶1抗体 | DLGAP2 Antibody Blocking Peptide |
| 肿瘤血管内皮标记蛋白2抗体 | DVL2 Antibody Blocking Peptide |
| 阿黑皮素原抗体 | Recombinant CRISPR-Cas9 protein, C-His |
| ATP依赖的解旋酶CHD1抗体 | FEM 1B Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化蛋白酶体PSMβ7抗体 | NEI3 Antibody Blocking Peptide |
| 线粒体核糖体蛋白L50抗体 | INHBA Antibody Blocking Peptide |
| 干扰素诱导跨膜蛋白2抗体 | 生物素标记的小鼠抗兔IgMCXCR4 Antibody Blocking Peptide |
| 甲状腺核转录因子-1抗体 | PRKAA2 Antibody Blocking Peptide |
| LYNX1蛋白抗体 | LYRM2 Antibody Blocking Peptide |
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文献和实验法测定IgM抗体,导致假阳性反应。因此中和IgG的间接法近来颇受青睐,用这类试剂检测抗CMV IgM和抗弓形虫IgM抗体已获成功。 7.ABS-ELISA法 ABS为亲和素(avidin)生物素(biotin)系统(system)的略语。亲和素是一种糖蛋白,分子量60000,每个分子由4个能和生物素结合的亚基组成。生物素为小分子化合物,分子量244。用化学方法制成的衍生物素- 羟基琥珀酰亚胺酯可与蛋白质和糖等多种类型的大小分子形成生物素标记产物,标记方法颇为简便。生物素与亲和素的结合具有很强
FITC标记的B抗体染色,根据两种抗体的动物种属不同,可用直接法也可用间接法,结果A抗原呈现橘红色荧光,而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中,常用的方法是免疫荧光组织化学中间接法和SABC-Cy3法相结合。例如,在实验设计时,选择小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作为两种不同的特异性一抗,相匹配的二抗分别为FITC-抗小鼠IgG和生物素化―抗兔IgG。进行双重染色时,由于两种一抗种属来源不同,可把一抗混合使用。孵育结束后洗涤未结合的一抗,滴加二抗时,先加人生物素化―抗兔IgG(二抗)孵育,洗涤后,滴加SABC-Cy
,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,最好选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、生物素等)的抗兔IgG。 如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG 的细胞裂解物样本的western blotting检测,尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot 检测中则结合出现IgG 分子50 and 25 kDa 的重链和轻链
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