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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
31
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
Rabbit
- 抗体英文名:
Rabbit Anti-Dog IgM/HRP
- 抗体名:
辣根过氧化物酶标记的兔抗犬IgM抗体
- 免疫原:
Native Dog IgM
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
WB=1:1000-10000, IHC-P=1:100-500, IHC-F=1:100-1000, ELISA=1:1000-10000 not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
- 保存条件:
Store at -20℃
- 浓度:
2.0 mg/ml
- 规格:
100ul
英文名称:Rabbit Anti-Dog IgM/HRP
中文名称:辣根过氧化物酶标记的兔抗犬IgM抗体
别名:Rabbit Anti-Dog IgM (HRP); Immunoglobulin M;
抗体来源:Rabbit
克隆类型:Polyclonal
交叉反应: Human
产品应用:WB=1:1000-10000, IHC-P=1:100-500, IHC-F=1:100-1000, ELISA=1:1000-10000
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
性状:Liquid
浓度:2.0 mg/ml
免疫原:Native Dog IgM
亚型:IgG
纯化方法:affinity purified by Protein A
缓冲液:10 mM TBS (pH=7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% glycerol.
保存条件:Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
注意事项:
1、一抗种属不同,最好都是单抗,二抗匹配对应的一抗,二抗不同荧光标记。如果可以,二抗最好来自同一宿主物种。
2、一抗是单克隆抗体时:二抗应针对一抗的类或亚类。例如,mouse IgM一抗需要抗mouse IgM二抗。当使用多个亚类特异性一抗时,应使用亚类特异性二抗来区分一抗。例如,使用IgG2和IgG1一抗的免疫荧光双标实验使用抗IgG2和抗IgG1二抗更优。
3、一抗是多克隆抗体时:可以使用IgG二抗,因为大多数多克隆抗体是IgG类免疫球蛋白。
4、为了限制二抗与近缘种的一抗非特异性结合,使用对近缘种预吸附的二抗。例如,抗mouse二抗可能与rat一抗发生交叉反应。使用rat血清吸附的抗mouse二抗可减少交叉反应性。注:谨慎选择对近亲属物种(如rat和mouse)预先吸附的二抗,吸附可消除高亲和力抗体,导致信号减弱。
5、封闭液的选择:封闭液作用就是尽量封闭掉能与二抗结合产生非特异性染色的抗原。所以,封闭液尽量选择与二抗种属同源的血清封闭液。比如,二抗是“donkey抗goat AF488、donkey抗rabbit AF594”,那么最佳封闭液就是donkey血清封闭液。免疫荧光双标实验中二抗种属来源于非mouse、非rabbit、非goat,而是选择donkey、马、鸡等种属来源,并且二抗采用一样的种属来源,这样可以一种来源的血清完成两个抗体的封闭。
6、两种一抗同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要自我摸索,一抗4℃孵育过夜比较好。
7、荧光染色后一般在1h内完成观察,或于4℃保存4h,时间过长,可能会使荧光提前衰退。
一抗与二抗的区别:
第一抗体
第一抗体就是能和非抗体性抗原(特异性抗原)特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。
第二抗体
第二抗体是能和抗体结合,即抗体的抗体,其主要作用是检测抗体的存在,放大一抗的信号。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,去免疫异种动物,由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体,兔抗AIV IgG为第二抗体。第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)。
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
下列是公司正在出售的产品:
| 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶39抗体 | NT5DC2 Antibody Blocking Peptide |
| 蛋白质flightless-1同源物抗体 | PS24 Antibody Blocking Peptide |
| TRIM16L蛋白抗体 | SLPI Antibody Blocking Peptide |
| 组氨酸富含脯氨酸糖蛋白抗体 | EEF1AKMT3 Antibody Blocking Peptide |
| 单纯疱疹病毒糖蛋白D抗体 | DGKE Antibody Blocking Peptide |
| RNA结合泛素连接酶DZIP3抗体 | TAMM41 Antibody Blocking Peptide |
| EDEM3蛋白抗体 | EGFL7 Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化核糖体S6蛋白激酶抗体 | Nmnat1 Antibody Blocking Peptide |
| 防御素α4抗体 | NKX3-1 Antibody Blocking Peptide |
| S100B蛋白抗体 | PTPRN2 Antibody Blocking Peptide |
| 转录抑制蛋白Sin3b抗体 | SPIB Antibody Blocking Peptide |
| p21蛋白抗体 | SH2D4B Antibody Blocking Peptide |
| 蛋白激酶B单克隆抗体 | 辣根过氧化物酶标记的兔抗犬IgM抗体NPY5R Antibody Blocking Peptide |
| 锌指蛋白821抗体 | CPO Antibody Blocking Peptide |
| 7号染色体开放阅读框30抗体 | FAM168A/TCRP1 Antibody Blocking Peptide |
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文献和实验1. 8 mg 辣根过氧化物酶放入1 ml玻璃瓶,加入1 ml双蒸水溶解,液体呈棕色。 2. 放入一个磁力搅拌子,电磁搅拌同时逐滴缓缓加入新配制的 NaIO4 0.2 ml,室温下继续搅拌40 min,液体呈现草绿色。 3. 将全部溶液用滴管装入反复用去离子水冲洗的透析袋中,4 oC 对1 mM pH 4.4的NaAc透析过夜,中间换液3-4次,每次300 ml,溶液最终呈浅棕色。 4.
辣根过氧化物酶标记凝聚素的组织化学染色程序 1.组织切片脱蜡处理等同前; 2.流水冲洗5分钟,3%H2 O2 孵育10分钟(阻断内源性过氧化物酶,避免假阳性); 3.PBS漂洗3次,每次5分钟; 4.1%牛血清白蛋白孵育,室温20分钟,移去多余液体; 5.加入PBS稀释的辣根过氧化物酶―凝集素,置湿盒内孵育。室温1.5小时; 6.PBS漂洗3次.每次5分钟; 7.呈色 DAB
蛋白质印迹分析(Western Blot Analysis)
缓冲溶液中,转移时间可从45分钟延长到过夜进行。 由于湿法的使用弹性更大并且没有明显浪费更多的时间和原料,因此我们在这里只描述湿法的基本操作过程。 对于目的蛋白的识别需要采用能够识别一抗的第二抗体。该抗体往往是购买的成品,已经被结合或标记了特定的试剂,如辣根过氧化物酶。这种标记是利用辣根过氧化物酶所催化的一个比色反应,该反应的产物有特定的颜色且固定在固相载体上,容易鉴别。因此可通过对二抗的识别而识别一抗,进而判断出目标蛋白所在的位置。其他的识别系统包括碱性磷酸酶系统和 125
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