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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
32
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
Mouse
- 抗体英文名:
Mouse Anti-Bov IgG/Gold
- 抗体名:
胶体金标记的小鼠抗牛IgG
- 免疫原:
Native Bovine IgG
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
0.4 mg/ml
- 保存条件:
Store at -20℃
- 浓度:
0.4 mg/ml
- 规格:
500ul
英文名称:Mouse Anti-Bov IgG/Gold
中文名称:胶体金标记的小鼠抗牛IgG
别名:Mouse Anti-Bovine IgG(Gold); Immunoglobulin G;
抗体来源:Mouse
克隆类型:Polyclonal
交叉反应: Human
产品应用:
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
性状:Liquid
浓度:0.4 mg/ml
免疫原:Native Bovine IgG
亚型:IgG
纯化方法:affinity purified by Protein G
缓冲液:10 mM TBS (pH=7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% glycerol.
保存条件:Store at 2-8℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
| Immunoglobulin G (IgG), is one of the most abundant proteins in serum with normal levels between 8-17 mg/mL in adult blood. IgG is important for our defence against microorganisms and the molecules are produced by B lymphocytes as a part of our adaptive immune response. The IgG molecule has two separate functions; to bind to the pathogen that elicited the response and to recruit other cells and molecules to destroy the antigen. The variability of the IgG pool is generated by somatic recombination and the number of specificities in an individual at a given time point is estimated to be 1011 variants. |
第一抗体
第一抗体就是能和非抗体性抗原(特异性抗原)特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。
第二抗体
第二抗体是能和抗体结合,即抗体的抗体,其主要作用是检测抗体的存在,放大一抗的信号。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,去免疫异种动物,由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体,兔抗AIV IgG为第二抗体。第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)。
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
注意事项:
1、一抗种属不同,最好都是单抗,二抗匹配对应的一抗,二抗不同荧光标记。如果可以,二抗最好来自同一宿主物种。
2、一抗是单克隆抗体时:二抗应针对一抗的类或亚类。例如,mouse IgM一抗需要抗mouse IgM二抗。当使用多个亚类特异性一抗时,应使用亚类特异性二抗来区分一抗。例如,使用IgG2和IgG1一抗的免疫荧光双标实验使用抗IgG2和抗IgG1二抗更优。
3、一抗是多克隆抗体时:可以使用IgG二抗,因为大多数多克隆抗体是IgG类免疫球蛋白。
4、为了限制二抗与近缘种的一抗非特异性结合,使用对近缘种预吸附的二抗。例如,抗mouse二抗可能与rat一抗发生交叉反应。使用rat血清吸附的抗mouse二抗可减少交叉反应性。注:谨慎选择对近亲属物种(如rat和mouse)预先吸附的二抗,吸附可消除高亲和力抗体,导致信号减弱。
5、封闭液的选择:封闭液作用就是尽量封闭掉能与二抗结合产生非特异性染色的抗原。所以,封闭液尽量选择与二抗种属同源的血清封闭液。比如,二抗是“donkey抗goat AF488、donkey抗rabbit AF594”,那么最佳封闭液就是donkey血清封闭液。免疫荧光双标实验中二抗种属来源于非mouse、非rabbit、非goat,而是选择donkey、马、鸡等种属来源,并且二抗采用一样的种属来源,这样可以一种来源的血清完成两个抗体的封闭。
6、两种一抗同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要自我摸索,一抗4℃孵育过夜比较好。
7、荧光染色后一般在1h内完成观察,或于4℃保存4h,时间过长,可能会使荧光提前衰退。
下列是公司正在出售的产品:
| 磷酸化信号转导与转录激活因子1抗体 | CTGFL Antibody Blocking Peptide |
| 细胞表面趋化因子受体7抗体 | CLPS Antibody Blocking Peptide |
| 蜜蜂微孢子虫蛋白抗体 | WIG-1/PAG608 Antibody Blocking Peptide |
| 铜转运蛋白2抗体 | C2orf27 Antibody Blocking Peptide |
| 硒蛋白N抗体 | GBA Antibody Blocking Peptide |
| 骨形态发生蛋白2受体抗体 | PRS45 Antibody Blocking Peptide |
| A型钾离子通道调节蛋白4抗体 | EIF3S4 Antibody Blocking Peptide |
| L2HGDH蛋白抗体 | CCDC112/MBC1 Antibody Blocking Peptide |
| 7号染色体开放阅读框42抗体 | ASMTL Antibody Blocking Peptide |
| 核因子活化T细胞胞浆蛋白2抗体 | c-kit/CD117 antigen Antibody Blocking Peptide |
| 白细胞介素5抗体 | phospho-DAXX (Ser495) Antibody Blocking Peptide |
| 多通道膜蛋白PTCHD2抗体 | NFYB Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化14-3-3E蛋白抗体 | 胶体金标记的小鼠抗牛IgGMMP2 Antibody Blocking Peptide |
| 9号染色体开放阅读框37抗体 | CENPV Antibody Blocking Peptide |
| 胰腺癌转移相关蛋白RLLM1抗体 | Alpha-ENaC Antibody Blocking Peptide |
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文献和实验12000 说明:GAR IgG=羊抗兔IgG;RAM IgG=兔抗鼠IgG;ALcc IgG=抗肝细胞癌IgG; SPA=葡萄球菌A蛋白 表5-7 几种免疫金探针离心纯化时所用转速 胶体金颗粒(nm) pH
免疫金银染色方法敏感、简便、省时、安全可靠,葡萄球菌A蛋白(SPA)金标记四步法是在此基础上发展起来的更为敏感的一种新方法。SPA和许多哺乳类动物IgG具有亲和性,且它们之间的连接不会干扰抗原——抗体的结合。简单的SPA金标记二步法后,第三步用抗SPA与SPA金表面分子通过Fab或Fc段相结合,结果结合更多的胶体金颗粒,再通过银增强,使原始信号得到几何级放大,其染色原理见图。双PAG免疫金银染色原理(一)染色流程:(1)石蜡切片常规脱蜡至水,0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min
胶体金与兔抗牛IgG用量比例的确定 每ml胶体金所需的最低稳定蛋白量是30µg,根据 试剂 用量增加20%,所以每ml胶体金所需的最低稳定兔抗牛IgG量为36µg。 3.金标记兔抗牛IgG的制备 取所需量的兔抗牛IgG,加入少许去离子水,用0.1Mol/L K 2 CO 3 溶液调pH值为9.0(用精密pH试纸测定),同时胶体金溶液的pH值也调至
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