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- 英文名:
Rabbit anti-Mouse Kappa light chain/PE-CY5
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20
- 供应商:
上海吉至生化科技有限公司
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文献和实验可以将干扰扣除,但补偿值越大,补偿后的信号分辨率会降低越厉害。最好选择很少或者没有重叠的荧光基团,以最大限度减少这种渗漏。不同激光激发的染料是首选,如PE和APC,但在某些情况下,这可能与尽量选择亮的荧光素的规则是冲突的。如在进行四色分析时,经常会将PE-Cy5标记的抗体与APC标记的抗体搭配使用。因为Cy5的激发波长与APC的激发波长相近,所以PE-Cy5与APC均可被红色激光(640nm)所激发,而两者的发送光谱也比较接近,导致PE-Cy5与APC的颜色补偿很难调整。相反,由于PE-Cy5.5中的
抗体二抗上连接有荧光染料。直接标记染色背景低,实验程序少尽量减少实验工序和过程,以保证实验的真实和准确性。因此在条件允许的范围内,建议尽量用直接标记的抗体进行实验。 3、流式抗体荧光标记的选择: 如果实验中检测单一指标:不同荧光标记在不同的仪器上强度不同。以某仪器为例:PE >APC >PE-Cy5 >PerCP >FITC >PerCP-Cy5.5,通常来说,PE最强,适用于弱表达抗原。FITC强度较弱,适用于强表达抗原,使用范围比较广。用户需根据检测的目标蛋白进行具体选择。 如果同时检测多个
) Propidium Iodide Staining Solution(51-66211E) 三、实验步骤贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding
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