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Rabbit Anti-Bovine IgG/RBITC
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20
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上海吉至生化科技有限公司
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文献和实验7h,经葡萄糖凝胶G-50柱层析,除去游离荧光素,分装,保存于4℃备用; 四甲基异硫氰酸罗丹明标记抗体: 1. 量取10ml浓度为6mg/ml的IgG,加在浓度为0.1mol/L pH9.5的碳酸盐缓冲液中透析过夜; 2. 将四甲基异硫氰酸罗丹明按每毫克IgG加入5—20µg的比例溶于浓度为1mg/ml二甲基亚砜中,取此溶液300µl,逐滴加入抗体溶液中,同时用电磁搅拌; 3. 在室温中避光搅拌2h; 4. 把结合物移入直径3cm,高30cm的Bio-Gel P-6层析
问:各位大侠能不能告诉我碱性磷酸酯酶标记的蛋白A和IgG二者在elisa中有何区别!它们的实验效果有什么不同?答;是有所不同的,前者是运用蛋白A与抗体(可以是各种可与抗原反应免疫球蛋白)的fc'片断进行非特异性的结合而起到代替二抗的效果。而IgG是针对一抗(主要是某一特定的与抗原反应的Ig,可能会因为轻链的相同的产生交叉反应)的抗抗体,其反应是特异性的。因而在实验中要根据你的需要来做选择,前者是不能很好的区分Ig的种类,而后者可以。这在疾病诊断中是很有意义的。
胶体金与兔抗牛IgG用量比例的确定 每ml胶体金所需的最低稳定蛋白量是30µg,根据 试剂 用量增加20%,所以每ml胶体金所需的最低稳定兔抗牛IgG量为36µg。 3.金标记兔抗牛IgG的制备 取所需量的兔抗牛IgG,加入少许去离子水,用0.1Mol/L K 2 CO 3 溶液调pH值为9.0(用精密pH试纸测定),同时胶体金溶液的pH值也调至
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